Phusion U Hot Start DNA Polymerases

Name: Phusion U Hot Start DNA Polymerases
SKU: F555S

La ADN polimerasa Thermo Scientific Phusion U es una enzima innovadora de alta fidelidad desarrollada con tecnología de fusión. DebidoMás información

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Precio (MXN)

Color:

Colorless

N.º de reacciones:

100 reacciones

Pedido a granel o personalizado

La ADN polimerasa Thermo Scientific Phusion U es una enzima innovadora de alta fidelidad desarrollada con tecnología de fusión. Debido a una mutación patentada en el llamado bolsillo de unión dUTP de Phusion, Phusion U supera una importante limitación de las enzimas de corrección: es capaz de incorporar dUTP y leer a través del uracilo presente en los moldes de ADN.

Además de la posibilidad de uso del uracilo, Phusion U presenta todas las propiedades superiores de otras ADN polimerasas Phusion: gran precisión, velocidad, capacidad para amplicones largos de hasta 20 kb y una alta especificidad con el inicio en caliente basado en Affibody. Estas características hacen de la ADN polimerasa Phusion U Hot Start una opción excelente para aplicaciones tan importantes como la amplificación de ADN convertido o dañado de bisulfito, así como el uso de control de contaminación cruzada.

La ADN polimerasa Phusion U Hot Start Green es una combinación de ADN polimerasa Phusion U Hot Start y tampones 5X Phusion Green. Los tampones incluyen un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento para la carga directa de los productos de PCR en un gel. El tampón de color no interfiere con el rendimiento Phusion U y es compatible con aplicaciones posteriores como la secuenciación del ADN, la ligación y la digestión de enzimas de restricción.

Aspectos destacados

• Precisión: ADN polimerasa de alta fidelidad (25x Taq)
• Tolerancia al uracilo: diseñado para incorporar dUTP y amplificar moldes con uracilo
• Especificidad: inicio en caliente para amplificación no específica reducida y degradación de cebadores
• Velocidad: tiempos de extensión breves (15-30 s/kb)
• Formato verde: permite la carga directa de productos de PCR en geles

Aplicaciones

• Amplificación de ADN convertido en bisulfito
• Amplificación de ADN dañado o envejecido
• Control de contaminación cruzada
• Métodos de clonación basados en escisión de uracilo (USER)

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasas Phusion son diferentes de las de muchas ADN polimerasas comunes (Como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora de Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

ColorColorless

Fidelidad (frente a Taq)25 X

Inicio en calienteInicio en caliente integrado

N.º de reacciones100 reacciones

SobranteRomo

PolimerasaADN polimerasa Phusion U Hot Start

Tipo de productoADN polimerasa de inicio en caliente

Cantidad100 unidades

Formato de reacciónIndependiente

Condiciones de envíoDry Ice

Tamaño (producto final)20 kb o menos

Concentración2 U/μl

Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR, High-fidelity PCR

GC-Rich PCR PerformanceAlto

Velocidad de reacciónFast

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Incluye:
• ADN polimerasa Phusion U Hot Start, 2 u/μl
• Tampón 5X HF Phusion
• Tampón de GC 5X Phusion
• DMSO
Los tampones HF Phusion y los tampones GC Phusion proporcionan 1,5 mm de MgCl₂ en la concentración final de 1X.

Almacénese a -20 °C.

Preguntas frecuentes

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

What nucleotide analogues can I use with DyNAzyme and Phusion DNA Polymerases?

DyNAzyme II DNA Polymerase can use dUTP, biotinylated dNTPs, 7-deaza-dGTP, digoxigenin-dUTP, bromo-dUTP, radiolabeled dNTPs and ITP. DyNAzyme EXT DNA Polymerase and Phusion DNA Polymerase cannot read dUTP-derivatives or dITP in the template strand so the use of these analogues is not recommended. Use Phusion U Hot Start DNA Polymerase for amplification of dUTP and dITP containing templates.