Thermo Scientific™

Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für RT-qPCR

Name: Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für RT-qPCR
SKU: K1672
Price: 1.541.65 EUR

Beim Thermo Scientific Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR handelt es sich um ein anwenderfreundliches System, dasWeitere Informationen

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Katalognummer	Enthält	Anzahl Reaktionen
K1672	Kit with dsDNase	200 Reaktionen
K1641	Kit only	50 Reaktionen
K1642	Kit only	200 Reaktionen
K1671	Kit with dsDNase	50 Reaktionen

4 Optionen

Katalognummer K1672

Preis (EUR)

1.541,65

Exklusiv online

1.658,00

Ersparnis 116,35 (7%)

Each

Enthält:

Kit with dsDNase

Anzahl Reaktionen:

200 Reaktionen

Großbestellung oder individuelle Größe anfordern

Preis (EUR)

1.541,65

Exklusiv online

1.658,00

Ersparnis 116,35 (7%)

Each

Beim Thermo Scientific Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR handelt es sich um ein anwenderfreundliches System, das für die cDNA-Synthese in zweistufigen, quantitativen Echtzeit-PCR-Anwendungen (RT-qPCR) optimiert wurde. Im Kit enthalten ist die Maxima Reverse Transkriptase (RT) – ein leistungsstarkes Enzym, das durch die In-vitro-Evolution von M-MuLV RT hergestellt wurde. Das Enzym zeichnet sich durch eine hohe Thermostabilität und Robustheit aus und bietet im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT eine höhere cDNA-Syntheserate.

Das Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR ermöglicht eine reproduzierbare cDNA-Synthese aus unterschiedlichen Mengen von Gesamt-RNA (1 pg bis 5 μg) bei erhöhten Temperaturen (42 bis 65°C). Die Synthesereaktion kann innerhalb von 15 bis 30 Minuten abgeschlossen werden. Komponenten des Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR sind bereits vorgemischt. Dies spart Zeit und verringert die Möglichkeit von Fehlern beim Pipettieren.

überblick

• Hohe Ausbeuten von cDNA mit voller Länge (bis zu 20 kb)
• Effiziente cDNA-Synthese über einen breiten Temperaturbereich von 42°C bis 65°C
• Beschleunigte Synthese: komplette cDNA-Synthese in 15 bis 30 Minuten
• Hohe Sensitivität und Spezifität

Anwendungen

• Zweistufige RT-PCR
• Zweistufige RT-qPCR

Inhalt des Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR:
• Maxima Enzymgemisch
• 5x Reaktions-Mix
• Nuklease-freies Wasser

Weitere Informationen zu den Reaktionskomponenten
Das Maxima Enzymgemisch enthält Maxima Reverse Transkriptase und Thermo Scientific RiboLock RNase Inhibitor. Der rekombinante RiboLock RNase-Inhibitor schützt RNA-Templates bei Temperaturen bis zu 55°C wirksam vor der Zersetzung durch die RNasen A, B und C.

Der 5x Reaktions-Mix umfasst die restlichen Reaktionskomponenten: Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo(dT)₁₈ und Random Hexamer-Primer.

Zur Reaktionsvorbereitung und Verdünnung der Proben-RNA ist Nuklease-freies Wasser im Lieferumfang enthalten. Mit Hilfe geeigneter Qualitätsprüfungen wurde sichergestellt, dass keine Endo-, Exodesoxyribonukleasen, Ribonukleasen und Phosphatasen vorhanden sind.

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Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für RT-qPCR, mit dsDNase
Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für RT-qPCR
Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit – Reaktions-Mix (5x)

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

EndprodukttypErststrang-cDNA

FormatKit

EnthältKit with dsDNase

Anzahl Reaktionen200 Reaktionen

Optimale Reaktionstemperatur50 °C bis 55 °C

Menge200 x 20 μl-Reaktionen

ReaktionsformatSeparate Komponenten

ReagenztypReverse Transkription

Reverse TranskriptaseMaxima

Ribonuklease-H-AktivitätJa

VersandbedingungTrockeneis

Größe (Endprodukt)Bis 20 kb

AusgangsmaterialRNA

VerfahrenReverse Transkription

Zur Verwendung mit (Anwendung)Real-Time PCR (qPCR)

GC-Rich PCR PerformanceHoch

Reaktionsgeschwindigkeit30 min

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Inhalt des Maxima Erststrang-cDNA-Synthesekits mit dsDNase:
•Maxima Enzymgemisch (Maxima Reverse Transkriptase und RiboLock RNase Inhibitor)
• 5X Reaktionsgemisch (Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo(dT)₁₈ und Random-Hexamer-Primer)
• dsDNase
• 10X dsDNase-Puffer
• nukleasefreies Wasser

Bei -20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I inactivate Thermo Scientific dsDNase?

dsDNase can be inactivated by incubating the sample at 55°C for 5 min in the presence of 10 mM DTT.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

Does dsDNase cleave ssDNA?

No, dsDNase cleaves only double-stranded DNA. However, if ssDNA forms double-stranded structures, it will act as a target for dsDNase. Because of this, long and complex ssDNA may be partially degraded. Therefore we recommend additional dsDNase inactivation step for RT-PCR amplification of targets 3 kb or longer. The inactivation step should be performed by 5 min incubation at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT.

Can dsDNase be added directly to a reverse transcription reaction to remove genomic DNA?

No. RT reaction composition inhibits dsDNase activity, and genomic DNA removal may be incomplete.

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