Das Calciumphosphat-Transfektionskit bietet hochwertige Reagenzien, um die Einbringung von DNA in eukaryotische Zellen über Calciumphosphat-Kopräzipitation zu ermöglichen.
Funktionsweise Die Calciumphosphat-Transfektionsmethode zur DNA-Einbringung in Säugetierzellen basiert auf der Bildung eines Calciumphosphat-DNA-Präzipitats. Calciumphosphat erleichtert die Bindung der DNA an die Zelloberfläche. DNA gelangt dann durch Endocytose in die Zelle. Die Methode wurde ursprünglich von Graham und van der Ebb entwickelt und später von Wigler modifiziert. Das Verfahren wird routinemäßig zur Transfektion einer Vielzahl von Zelltypen bei der transienten Expression oder zur Herstellung stabiler Transformanten verwendet. Die DNA wird direkt mit einer konzentrierten Lösung von CaCl2 gemischt, die dann tropfenweise zu einem Phosphat-Puffer gegeben wird, sodass ein feines Präzipitat entsteht. Durch Luftzufuhr zum Phosphat-Puffer während der Zugabe der DNA-CaCl2-Lösung wird gewährleistet, dass der Niederschlag möglichst fein ausgefällt wird, da verklumpte DNA nicht so effizient an der Zelle anhaftet und in sie eindringen kann.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.