Das LIVE/DEAD™ Fixable Blue Dead Cell Stain Kit dient zur Bestimmung der Viabilität von Zellen vor der Fixierung und Permeabilisierung, die für die Färbung intrazellulärer Antikörper oder vor der Beseitigung biogefährlicher Materialien mittels Formaldehyd-Fixierung erforderlich ist. Dieses Kit wurde für die Verwendung mit einem Durchflusszytometer mit UV-Laser optimiert und validiert.

• Stabil — Farbstoffe werden in separaten Fläschchen gefriergetrocknet, um Stabilität zu erhalten

• Robust — Färbemuster ist vor und nach der Fixierung gleich

• Helles Signal — Ermöglicht eine einfache Unterscheidung zwischen lebenden/toten Zellen in einem Kanal

Sehen Sie sich eine Auswahlanleitung für alle fixierbaren Viabilitätfarbstoffe für die Durchflusszytometrie an.

Stabil
Im Gegensatz zu Produkten, die als Lösung verkauft werden, wurden die LIVE/DEAD™ Fixable Blue Stain praktisch in 40 Testfläschchen verpackt, um eine langanhaltende Stabilität und Leistung des Farbstoffs zu gewährleisten. Amin-reaktive Farbstoffe in Lösung verlieren ihre Wirksamkeit nach kurzer Zeit. Es ist daher empfehlenswert, das Röhrchen nach der Rehydrierung komplett aufzubrauchen. Falls dies nicht möglich ist, aliquotieren Sie die Röhrchen in kleinere Volumen, und bewahren Sie diese bei -80 °C unter Vermeidung von wiederholtem Einfrieren und Auftauen auf.

Robust
Farbstoffe, die zur Kenntlichmachung toter Zellen eingesetzt werden, können nach bestimmten Behandlungsverfahren an Empfindlichkeit verlieren. Dazu gehören die Behandlung mit Fixiermitteln wie Formaldehyd oder Fixiermethoden, die auf Ethanol basieren und die für intrazelluläre Phosphorylierungsstudien benötigt werden. Der LIVE/DEAD™ fixierbare blaue Farbstoff ist ein Amin-reaktiver Farbstoff, der kovalent an intrazelluläre und extrazelluläre Amine bindet. Das Färbungsmuster bleibt nach der Formaldehyd-Fixierung erhalten.

Optimale Helligkeit
Der LIVE/DEAD™ fixierbare blaue Farbstoff wurde wegen seiner fluoreszierenden Eigenschaften ausgewählt und erzeugt nach Anregung durch einen UV-Laser ein helles Signal. Der blau-fluoreszierende reaktive Farbstoff hat ein Anregungsmaximum von ∼350 nm, und ist daher für den Einsatz mit einem UV-Laser bei einer Emission von ∼450 nm hervorragend geeignet. Durch Umschalten der Vitalfärbung von einem Kanal ab dem blauen 488 nm-Laser auf den UV-Laser öffnen Sie einen Kanal auf dem Durchflusszytometer für andere Reagenzien, die in anderen Farben als FITC oder PE schwer zu finden sind. Durch die Verwendung des UV-Lasers gibt es keine spektralen Überlappungsprobleme mit anderen gemeinsamen Farbstoffen, wodurch die Notwendigkeit zur Kompensation der Farbstoffe zur Vitalfärbung von anderen Färbungen in Ihrem Panel entfällt. Da lebende und tote Zellen mit einem einzigen Farbstoff und einem einzigen Kanal eines Durchflusszytometers diskriminiert werden können, ist er ideal für mehrfarbige Experimente.

Funktionsweise
In Zellen mit beeinträchtigten Membranen reagiert der Farbstoff mit freien Aminen sowohl im Zellinneren als auch auf der Zelloberfläche, was zu einer intensiven fluoreszierenden Färbung führt. Bei lebensfähigen Zellen ist die Reaktivität des Farbstoffs auf die Amine der Zelloberfläche beschränkt und die Fluoreszenz weniger intensiv. Der Unterschied zwischen den Intensitäten beträgt in der Regel mehr als das 50-Fache zwischen lebenden und toten Zellen, sodass eine Unterscheidung problemlos möglich ist.

Erhältliche Farben
LIVE/DEAD™ Fixable Dead Cell Stains sind in unterschiedlichen Farben erhältlich, um eine flexible Kombination mit anderen Farbstoffen zu ermöglichen.