Le réactif de dosage protéique de 660 nm Pierce est un réactif prêt à l’emploi, compatible avec les détergents et les agents réducteurs pour mesurer rapidement la concentration protéique totale. Le dosage est plus linéaire que les dosages au bleu de Coomassie et compatible avec des concentrations supérieures de la plupart des détergents, agents réducteurs et autres réactifs courants.

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Caractéristiques du kit de dosage protéique de 660 nm :
• Compatibilité : fonctionne avec une plus grande variété de détergents et d’agents réducteurs que les autres tests à base de colorants
• Prêt à l’emploi : un seul réactif avec un protocole simple de mélange et de lecture ; pas de réactif de travail à préparer
• Linéarité : produit des courbes standard qui sont plus linéaires qu’avec la méthode de dosage Bradford
• Format de dosage : le dosage peut être effectué en tubes à essai ou en microplaques
• Volume d’échantillon : ne nécessite que 10 µl pour les microplaques ou 100 µl pour les procédures en tube à essai
• Stockage : stockage à température ambiante

Le réactif accessoire de compatibilité avec le détergent ionique (IDCR) permet une compatibilité encore plus large avec les détergents, ce qui en fait l’un des seuls dosages de protéines adapté aux échantillons contenant du tampon d’échantillon SDS Laemmli avec du bleu de bromophénol. Bien que le dosage protéique de 660 nm Pierce produise un niveau plus élevé de variation protéine-protéine (37 %) que d’autres dosages, tels que le dosage protéique BCA, le format simple à réactif et la compatibilité plus large des substances rendent le dosage de 660 nm Pierce plus pratique pour de nombreuses applications courantes. Le dosage protéique de 660 nm Pierce peut être effectué au format tube à essai ou microplaque.

Comment le dosage de 660 nm Pierce détecte les protéines
Le dosage protéique de 660 nm Pierce est basé sur la liaison d’un complexe colorant-métal exclusif aux protéines dans des conditions acides qui provoque un déplacement du maximum d’absorption du colorant, mesuré à 660 nm. Le complexe colorant-métal est brun rougeâtre et change en vert lors de la liaison aux protéines. Le changement de couleur est produit par la déprotonation du colorant à faible pH facilitée par les interactions avec les groupes d’acides aminés chargés positivement dans les protéines. Par conséquent, le colorant interagit principalement avec les résidus basiques des protéines, tels que l’histidine, l’arginine et la lysine et, dans une moindre mesure, la tyrosine, le tryptophane et la phénylalanine.

La couleur produite dans le test est stable et augmente profractionnellement à une large gamme de concentrations de protéines croissantes, même en présence de détergents et d’agents réducteurs qui seraient incompatibles avec les tests de protéines Bradford et BCA.

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