Kit de dosage protéique Pierce™ Coomassie (Bradford)

Le kit de dosage protéique Pierce Coomassie (Bradford) est une formulation stable et prête à l’emploi du réactif d’essai Bradford traditionnel pour la mesure de la concentration totale de protéines par rapport à un étalon de protéines. Le kit comprend le réactif de dosage protéique Coomassie et une boîte d’ampoules d’étalon d’albumine.

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Le kit de dosage protéique Pierce Coomassie est une formulation prête à l’emploi du réactif d’essai apprécié initialement décrit par Bradford en 1976. Lorsqu’il est mélangé à une solution protéique, le réactif acide du colorant Coomassie change de couleur, passant du marron au bleu proportionnellement à la quantité de protéines présentes dans l’échantillon. Les déterminations protéiques sont réalisées par comparaison avec la réponse colorée des étalons de dosage protéique, préparés généralement sous forme d’une série de dilutions connues d’albumine sérique bovine (BSA) ou de globuline gamma bovine (BGG). La procédure simple est adaptable à presque toutes les échelles de volume, y compris les tubes à essai, les cuves et les microplaques. Le dosage protéique est compatible avec la plupart des sels, solvants, tampons et thiols, ce qui réduit les substances et les chélateurs métalliques dans les échantillons protéiques.

Les caractéristiques du kit de dosage protéique Coomassie comprennent :
• Réactif Bradford : kit stable et prêt à l’emploi du réactif de dosage Bradford classique
• Colorimétrique : mesurez avec un spectrophotomètre étalon ou un lecteur de plaque à 595 nm
• Facile à utiliser : réactif unique ; aucune préparation de réactif de travail nécessaire
• Rapide : développement quasi immédiat des couleurs ; ajouter, mélanger et lire les résultats
• Plage de dosage : détecte une concentration de protéines comprise entre 1 et 1 500 µg / ml
• Flexible : protocoles de microplaques et de cuvettes fournis et adaptables à plusieurs gammes de travail cibles

Comment le dosage Coomassie (Bradford) détecte les protéines
Le développement de la couleur dans les dosages protéiques à base de colorant Coomassie (Bradford) a été associé à la présence de certains acides aminés basiques (principalement l’arginine, la lysine et l’histidine) dans la protéine. Les forces Van der Waals et les interactions hydrophobes participent également à la liaison du colorant par protéine. Le nombre de ligands du colorant Coomassie liés à chaque molécule de protéine est à peu près proportionnel au nombre de charges positives sur la protéine. Les acides aminés libres, les peptides et les protéines au poids moléculaire faible ne génèrent pas de couleur avec les réactifs de colorant Coomassie. En général, la masse d’un peptide ou d’une protéine doit être d’au moins 3 000 daltons pour pouvoir être dosée avec ce réactif.

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