Kit de substrat Pierce™ DAB

Le kit de substrat DAB Thermo Scientific Pierce permet la détection chromogène de l’activité de la peroxydase de raifort (HRP) en fonction de l’action de la 3,3’-diaminobenzidine (DAB) dans les méthodes de transfert Western et de coloration des tissus.

Le DAB (tétrachlorhydrate de 3,3’-diaminobenzidine ; poids moléculaire = 214,1) réagit avec le HRP en présence de peroxyde pour produire un produit de couleur brune insoluble aux endroits où les anticorps conjugués de peroxydase sont liés à des échantillons. Le précipité marron est insoluble dans l’alcool et d’autres solvants organiques, ce qui en fait un excellent substrat pour la coloration immunohistochimique qui nécessite l’utilisation de contre-colorants et de milieux de montage traditionnels. Le kit de substrat DAB Pierce comprend une solution 10X de DAB et un tampon de substrat de peroxyde stable. Le DAB cristallin (poudre) est également disponible.

Caractéristiques du substrat DAB :

• Substrat HRP : pour la détection de l’activité de la peroxydase de raifort sur milieux solides, y compris les membranes en nitrate de cellulose et en PVDF et les échantillons de tissus fixes
• Chromogène : aucun équipement spécial requis pour la visualisation ; la réaction DAB produit des bandes ou des taches brunes aux sites de réaction avec des anticorps ou des sondes conjugués de HRP
• Options d’emballage : choisissez la poudre pour une formulation personnalisée avec du tampon et du peroxyde ou un kit complet de solutions préformulées pour une utilisation immédiate

Caractéristiques du kit de substrat DAB Pierce :

• Facile d’utilisation : diluer la solution mère 10X à 1 X dans le tampon de peroxyde stable fourni.
• Plus sûr : solution DAB préformulée minimise les préoccupations de sécurité avec ce produit chimique
• Complet : comprend une solution pratique de tampon de peroxyde d’hydrogène stable (N° de réf. 34062)
• Stable : conserver réfrigéré à 4°C pendant au moins un an ; le stockage au congélateur n’est pas nécessaire

Le DAB a été utilisé dans diverses applications, notamment le transfert Western, l’immunohistochimie et la microscopie électronique. De nombreuses méthodes d’amélioration ont été rapportées pour le DAB impliquant différentes conditions de tampon, l’ajout d’ions métalliques et d’applications de post-traitement (N°de réf. 1 à 7 ; voir également le kit de substrat DAB amélioré en métal Pierce, N°de réf. 34065). Un inconvénient de DAB par rapport à d’autres substrats est la nécessité d’utiliser la solution de travail immédiatement parce qu’elle commence un processus de réaction après l’ajout de peroxyde d’hydrogène. Cela entraîne une augmentation de la couleur de fond du substrat. Cependant, les bandes brunes résultant des réactions DAB ne s’estompent pas aussi rapidement que les produits de couleur d’autres substrats HRP précipitants.

Produits associés
Poudre de substrat DAB (tétrachlorhydrate de 3,3’-diaminobenzidine)