Solution Hoechst 33342 (20 mM)
Thermo Scientific™

Solution Hoechst 33342 (20 mM)

La coloration fluorescente Hoechst 33342 Pierce Thermo Scientific est une solution de haute qualité contenant du colorant Hoechst pour laAfficher plus
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RéférenceQuantité
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La coloration fluorescente Hoechst 33342 Pierce Thermo Scientific est une solution de haute qualité contenant du colorant Hoechst pour la coloration fluorescente d’ADN et de noyaux de cellules fixes et vivantes dans des techniques d’imagerie cellulaire.

Caractéristiques de la coloration fluorescente Hoechst 33342 :

Colorant Hoechst : coloration fluorescente bleue spéciale pour l’ADN (c.-à-d. les noyaux de cellules eucaryotes)
Pratique : fourni sous forme de solution de colorant Hoechst facile à utiliser (20 mM)
Imagerie cellulaire : le colorant perméable aux cellules est efficace pour la coloration de cellules fixes et vivantes
Contre-colorant : idéal pour une utilisation en parallèle avec la détection de cibles spécifiques avec des anticorps fluorescents pour la microscopie par fluorescence ou l’analyse à haute densité (HCS)

La coloration Hoechst 33342 (trihydrate trichlorhydrate de 2’-[4-éthoxyphényl]-5-[4-méthyl-1-pipérazinyl]-2,5’-bi-1H-benzimidazole) est une coloration d’ADN perméable aux cellules qui est excitée par la lumière ultraviolette et qui émet une fluorescence bleue entre 460 et 490 nm. Le colorant Hoechst 33342 se lie de préférence aux régions adénine-thymine (A-T) de l’ADN. Cette coloration se lie dans le sillon mineur de l’ADN et exhibe des spectres d’émission de fluorescence distincts qui dépendent des rapports colorant:paire de base.

Propriétés du colorant fluorescent Hoechst
En tant que contre-colorant utilisé dans l’imagerie de fluorescence, le colorant Hoechst est compatible avec les anticorps et d’autres sondes marqués avec des colorants de fluorescéine et de rhodamine, ainsi qu’avec les fluorures DyLight Thermo Scientific. La solution mère aqueuse stable de 20 mM est essentiellement prête à l’emploi.

Le colorant Hoechst 33342 est spécifiquement utilisé pour la coloration spécifique des noyaux de cellules et tissus vivants ou fixes. Cette coloration est couramment utilisée en association avec le marquage à la 5-bromo-2’-désoxyuridine (BrdU) pour distinguer la chromatine compacte des noyaux apoptotiques, identifier les cellules en cours de réplication et trier les cellules en fonction de leur contenu en ADN. Le colorant Hoechst 33342 et l’iodure de propidium sont fréquemment utilisés ensemble pour l’analyse simultanée de la cytométrie en flux et de l’imagerie par fluorescence des étapes de l’apoptose et de la distribution du cycle cellulaire.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
CouleurBleu
Concentration20 mM
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantPerméant aux cellules
Émission497 nm
Gamme de longueur d’onde d’excitation361 nm
À utiliser avec (application)Marquage fluorescent
À utiliser avec (équipement)Microscope à fluorescence, instrument à haute densité
FormeLiquide
Gamme de produitsPierce
Quantité5 mL
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Type d’étiquetteFluorescent Dye
Type de produitColoration
Sub Cellular LocalizationNucleus
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Dès réception, conserver à 4°C et à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

Is DAPI a good live-cell nuclear label?

DAPI is considered a semi-permeant/impermeant nucleic acid stain. Staining of nucleic is dependent upon the cell line in its performance. Some cell lines will label with DAPI, others not at all, and others label inconsistenly. Instead, we recommend using either Hoechst 33342 or Hoechst 33258, which have the same wavelength and binding mode as DAPI (at the A-T minor groove) but are readily cell-permeant.

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I want to label the nuclei of live cells and track them over time. Can I use DAPI for this?

We do not recommend doing this. DAPI is considered to be a semi-permeant/impermeant nucleic acid stain. DAPI staining of live cells may be inconsistent. It is best used as a counterstain for fixed samples. Other cell permeable nucleic acid stains, such as Hoechst or the SYTO dyes may affect cellular function.

For mammalian cells, we recommend using the CellLight Nucleus transduction reagents, available in CFP, GFP and RFP. With these reagents, the cells are transduced overnight in a single labeling step and the next day the nuclei will fluoresce. The label may be retained for 3-5 days and should not affect cell function. Cytoplasmic cell tracking dyes such as the CellTracker dyes may also be used.

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I have a mix of live bacteria and platelet cells, and I need to be able to separate out the bacteria. Do you have a suggestion?

Platelet cells don't have DNA, while bacteria do. Therefore, a cell-permeant, DNA-selective dye would preferentially stain the bacteria with limited staining of the platelets. We recommend using Hoechst 33342 dye.

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DAPI and Hoechst dyes are quite similar to each other. Why would I choose one over the other?

DAPI is a very common blue-fluorescent dye for nuclear counterstaining and gives very bright labeling on nuclei in fixed and permeabilized cells and tissues. However, it is considered to be a semi-permeant to impermeant stain and provides inconsistent staining of live cells. Hoechst 33342 dye is cell-permeant and stains with the same binding mechanism and fluorescent color; it is preferred for live-cell imaging and is just as good as DAPI for fixed cell labeling.

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Citations et références (10)

Citations et références
Abstract
Generation, transcriptome profiling, and functional validation of cone-rich human retinal organoids.
Authors:Kim S, Lowe A, Dharmat R, Lee S, Owen LA, Wang J, Shakoor A, Li Y, Morgan DJ, Hejazi AA, Cvekl A, DeAngelis MM, Zhou ZJ, Chen R, Liu W
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:31072937
'Rod and cone photoreceptors are light-sensing cells in the human retina. Rods are dominant in the peripheral retina, whereas cones are enriched in the macula, which is responsible for central vision and visual acuity. Macular degenerations affect vision the most and are currently incurable. Here we report the generation, transcriptome ... More
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Journal:Cell Stem Cell
PubMed ID:30951662
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PubMed ID:31607531
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