Les colonnes de dessalage en polyacrylamide de 7K MWCO (seuil de rétention des molécules) Thermo Scientific Pierce sont des colonnes de filtration sur gel prêtes à l’emploi et jetables, destinées à séparer les protéines et autres macromolécules des réactifs et sels tampons à faible poids moléculaire.

Les colonnes de dessalage en polyacrylamide de 7K MWCO Pierce sont préconditionnées avec des microbilles de polyacrylamide poreuses et permettent l’échange de tampon et le dessalage de protéines et d’autres échantillons macromoléculaires basés sur un seuil de rétention des molécules (MWCO) de 7 000. Contrairement aux résines d’exclusion stérique, la résine de polyacrylamide n’est pas sujette à la dégradation enzymatique et ne servira pas de milieu nutritif à la croissance bactérienne. La résine est très hydrophile, minimisant ainsi les interactions de liaison indésirables entre la résine et les molécules des échantillons. La contamination par des sucres de faible poids moléculaire (ce qui peut se produire avec de la résine de dextran réticulé) n’est pas un problème en cas d’utilisation de la résine de polyacrylamide. Les agents oxydants peuvent être retirés sans détruire le support. Cette résine est susceptible d’hydrolyser les groupes amides dans des conditions de pH extrêmes, ainsi un pH de fonctionnement compris entre 2 et 10 est recommandé à température ambiante. La résine de polyacrylamide peut également être autoclavée à un pH compris entre 5,5 et 6,5 pendant 30 minutes à 120°C.

Ces colonnes utilisent une résine dont les microbilles ont un diamètre humide compris entre 45 et 90 µM, et sont idéales pour la séparation des peptides et des petites macromolécules (supérieures à 1,8 kDa) des sels tampons et autres composés (inférieurs à 500 MW).

Caractéristiques de la résine de polyacrylamide :
• Stable dans l’eau, les solutions salines, les solvants organiques et les conditions alcalines ou acides
• Excellentes propriétés d’écoulement
• Thermostable

Applications :
• Élimination des sels des solutions de protéines
• Élimination du phénol dans les préparations d’acides nucléiques
• Séparation des agents de réticulation en excès dans les préparations de conjugués
• Élimination des agents dérivatisants en excès dans les protéines modifiées
• Élimination des colorants n’ayant pas réagi dans les anticorps fluorescents
• Élimination des radiomarqueurs libres dans les protéines marquées
• Remplacement du tampon

La filtration sur résine par écoulement par gravité implique la séparation chromatographique des molécules de différentes dimensions en fonction de leurs capacités relatives à pénétrer dans une phase stationnaire appropriée. Une matrice chromatographique, habituellement constituée de particules poreuses non chargées de très petite taille, dans une solution aqueuse, remplit une colonne et est utilisée pour la séparation. Différents niveaux de séparation sont possibles d’après la porosité du milieu remplissant la colonne. Le milieu peut être choisi de sorte à exclure complètement les protéines ou les grandes molécules, tout en incluant les petits solutés. Les grandes molécules sont exclues des pores internes de la résine et sortent en premier de la colonne. Les molécules de plus petite taille sont capables de pénétrer dans les pores et de progresser plus lentement dans la colonne. La colonne est ensuite nettoyée de ces petites molécules à l’aide d’un volume supplémentaire de tampon.

Le dessalage et l’échange de tampon sont deux des applications de chromatographie de filtration de résine les plus couramment utilisées.

Produits associés
Colonnes de dessalage par centrifugation en polyacrylamide Pierce™, MWCO de 7 K, 0,7 ml
Colonnes de dessalage en polyacrylamide, MWCO de 6 K, 10 ml