Le kit d’isolement des mitochondries pour cultures de cellules Thermo Scientific offre une méthode polyvalente, en tube de microcentrifugeuse, pour fractionner les mitochondries intactes à partir d’échantillons de cultures de cellules de mammifère, le tout en environ 40 minutes.

Caractéristiques du kit d’isolement des mitochondries pour cultures de cellules :

• Rapide : permet d’isoler des mitochondries intactes à partir de 20 millions de cellules en environ 40 minutes (après récolte des cellules)
• Flexible : permet de traiter plusieurs échantillons en même temps avec la méthode à base de réactifs, ou d’obtenir le rendement le plus élevé possible avec la méthode par homogénéisation de Dounce
• Optimisable : les consignes fournies permettent d’optimiser la pureté par rapport au rendement avec la méthode à base de réactifs
• Adapté aux applications de paillasse : l’isolement est réalisé dans un tube de microcentrifugeuse
• Compatible : les mitochondries isolées peuvent être lysées avec un détergent ou traitées pour presque toutes les applications en aval, y compris l’électrophorèse 2D

L’isolement de mitochondries est généralement un processus laborieux qui nécessite le traitement d’un seul échantillon par homogénéisation de Dounce. Le kit d’isolement de la mitochondrie utilise un réactif non mécanique, qui permet le traitement simultané de plusieurs (six) échantillons de cellules mises en culture en 40 minutes environ. Les culots de cultures de cellules de mammifères sont délicatement lysés à l’aide d’une formulation exclusive qui donne un rendement maximal en mitochondries, tout en préservant au mieux l’intégrité.

Les instructions du produit décrivent les consignes permettant d’optimiser les paramètres de pureté par rapport au rendement. Le kit offre également une procédure optimisée d’homogénéisation Dounce, qui se solde par une récupération des mitochondries deux fois plus importante par rapport au recours du réactif. Les deux méthodes reposent sur la centrifugation différentielle pour séparer les fractions mitochondriales et cytosoliques avec une microcentrifugeuse de paillasse. Elles durent environ 40 minutes (récolte cellulaire postérieure). Une fois isolées, les mitochondries peuvent être utilisées dans des applications en aval telles que les études sur l’apoptose, sur la transduction des signaux et sur le métabolisme, tout en facilitant les essais de protéomique mitochondriale.

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