Les colonnes de centrifugation de cobalt Thermo Scientific HisPur contiennent une résine d’agarose chélatrice tétradentate chargée en cobalt divalent (Co²⁺) pour obtenir des protéines marquées à pureté élevée sans contamination métallique.

Caractéristiques de la résine de cobalt HisPur :

• Pureté élevée : permet d’obtenir plus de 10 milligrammes de protéine marquée à l’histidine pure par millilitre de résine sans optimiser les conditions de lavage à l’imidazole
• Spécifique : le noyau de coordination cobalt-chélate lie moins de contaminants protéiques hôtes, offrant un bruit de fond inférieur aux résines au nickel
• Faible lessivage des métaux : pas de contamination par des métaux dans l’échantillon de protéines marquées à l’histidine éluées
• Polyvalence : permet de purifier des protéines dans des conditions natives ou dénaturantes ; compatibles avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce et une variété d’additifs pour tampon
• Solution économique : la résine peut être réutilisée plusieurs fois ou jetée après une seule utilisation
• Flexibilité : disponible sous forme de résine en vrac, de kits, de colonnes préremplies, de cartouches de chromatographie et de plaques de filtration à 96 puits

Par rapport aux résines chélatrices Ni-IDA et Ni²⁺ tétradentée, la résine HisPur Cobalt lie les protéines marquées à l’histidine avec une spécificité plus élevée (moins de liaison hors cible) et les libère dans des conditions plus douces (concentrations plus faibles d’imidazole). Même si les résines chélatrices au Ni²⁺ atteignent des rendements protéiques élevés, elles lient les protéines avec relativement peu de distinction, ce qui donne une pureté suboptimale. Souvent, d’autres étapes de nettoyage sont nécessaires. En revanche, le cobalt maximise la pureté des protéines sans sacrifier le rendement des protéines. La résine HisPur Cobalt lie moins de protéines non spécifiques, affiche moins de lessivage des métaux et permet l’utilisation de conditions d’élution plus douces que les résines au nickel.

La résine IMAC HisPur Cobalt lie spécifiquement les protéines recombinantes marquées à l’histidine, qui peuvent être récupérées efficacement à l’aide d’une élution douce à l’imidazole. Un millilitre de résine peut lier plus de 10 mg de protéine marquée à l’histidine lors de l’utilisation d’une protéine de fusion de 28 kDa exprimée et purifiée à partir d’un lysat d’E. coli.

Diverses protéines marquées à l’histidine peuvent être purifiées avec une pureté similaire ou supérieure à celle obtenue à partir d’autres résines IMAC au nickel ou au cobalt en utilisant un format de colonne de centrifugation ou de colonne à écoulement par gravité. Les performances de purification de la résine de cobalt HisPur ont été comparées à celles des résines IMAC d’autres fournisseurs en utilisant plusieurs protéines marquées par His de tailles et de niveaux d’expression différents. Les résultats démontrent que la résine HisPur Cobalt offre une pureté protéique maximale sans sacrifier le rendement protéique.

Formats disponibles :
• Suspensions de résine :agarose réticulée au plomb à 6 % ; flacons de 10 ml, 100 ml, 500 ml
• Colonnes de centrifugation :colonnes de 0,2 ml (microcentrifugeuse), 1 ml et 3 ml
• Kit de purification :kits complets disponibles pour les trois tailles de colonne
• Cartouche de chromatographie :en savoir plus et avoir un aperçu des données de la cartouche de chromatographie HisPur
• Plaques de centrifugation à 96 puits

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Kit de purification HisPur™, 0,2 ml
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