L’amplification du signal de tyramide SuperBoost™ est la méthode la plus sensible pour la détection de cibles peu abondantes dans l’immunocytochimie fluorescente multiplexable (ICC), l’immunohistochimie (IHC) et l’hybridation in situ (ISH). Les kits SuperBoost associent la luminosité des colorants AlexaFluor™ à l’amplification du signal supérieure d’une réaction de marquage par tyramide à médiation poly-HRP pour produire une sensibilité 10 à 200 fois supérieure aux méthodes standard. La sensibilité du kit SuperBoost est également 2 à 10 fois supérieure aux techniques d’amplification par tyramide standard, comme TSA™. Pour des recherches hors normes, les kits SuperBoost permettent d’affiner vos résultats pour une visibilité claire dans les domaines critiques que les méthodes d’imagerie standard ne révèlent pas.

Les kits SuperBoost sont simples à utiliser et facilement adaptés aux protocoles expérimentaux ICC, IHC ou FISH standard, en utilisant n’importe quel type de cellule ou de tissu. Les cellules marquées à l’aide d’un kit SuperBoost peuvent être imagées à l’aide de n’importe quel type de microscope pour produire des images multiplex haute résolution. Ce kit particulier est doté du tyramide AlexaFluor 555 (555/565 ex/em), détecté à l’aide d’un cube de filtre standard Orange / RFP / TRITC. Ce kit présente également un anticorps secondaire de chèvre anti-IgG de lapin conjugué au poly-HRP.

Caractéristiques des kits SuperBoost :
• Sensibilité supérieure pour identifier des cibles de faible niveau ou difficiles à détecter par imagerie de fluorescence
• Protocole simple et détection à l’aide de filtres standard
• Convient aux images multiplex haute résolution—co-marquées avec DAPI, anticorps secondaires et autres kits SuperBoost
• Nécessite 10 à 100 fois moins d’anticorps primaires que les essais standard ICC / IHC / ISH

Les kits SuperBoost reposent sur le système d’amplification du signal tyramide, qui utilise l’activité catalytique de la péroxydase de raifort (HRP) pour générer un marquage haute densité d’une séquence de protéines ou d’acides nucléiques cibles in situ. Un essai ICC / IHC / ISH typique avec un kit SuperBoost nécessite 10 à 100 fois moins d’anticorps primaires que les essais ICC / IHC / ISH standard. Les kits SuperBoost offrent une intensité du signal spécifique supérieure sur le fond, de sorte que le protocole est facilement optimisé pour détecter un signal spécifique dans les échantillons où une autofluorescence endogène élevée est observée.

Avantages des kits SuperBoost

Amélioration du signal à l’aide des tyramides Alexa Fluor : Les kits SuperBoost utilisent les tyramides Alexa Fluor, qui réagissent à HRP pour déposer du colorant Alexa Fluor lumineux et photostable sur les protéines environnantes et d’autres molécules similaires. Les kits SuperBoost sont les seuls kits à associer la luminosité des colorants Alexa Fluor à l’amélioration de l’amplification du signal tyramide pour produire un signal supérieur.

Amélioration du poly-HRP : Contrairement à TSA, les kits SuperBoost utilisent des anticorps secondaires conjugués au poly-HRP. Dans ces systèmes, plusieurs enzymes HRP sont conjugués à des polymères courts, ce qui améliore nettement le signal par rapport aux systèmes HRP habituels. Le poly-HRP est structuré de manière à ce que les anticorps pénètrent les cellules ou les tissus aussi efficacement que les anticorps secondaires conjugués à HRP. Le rapport molaire enzyme / protéine anticorps a une valeur moyenne de ’4’.

Solution d’arrêt de réaction : Comme tout système de marquage enzymatique, il est possible de surdévelopper le signal. Les kits SuperBoost comprennent une solution d’arrêt HRP pour arrêter la réaction HRP. La solution d’arrêt HRP permet d’obtenir un signal maximum, sans augmenter le signal de fond. Les images produites avec des temps de réaction HRP optimisés sont aussi nettes que les images produites avec les méthodes ICC / IHC / ISH standard, mais avec une sensibilité de 10 à 200 fois supérieure.

Réduction du bruit de fond : Les kits SuperBoost incluent des bloqueurs pour l’élimination ou la réduction de la péroxydase endogène et des signaux de fond fluorescents Grâce à ces bloqueurs, vous pouvez vérifier que seuls les signaux spécifiques sont améliorés tout en conservant les signaux non spécifiques / de fond sous contrôle.