Le test Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 555 HCS est une alternative supérieure aux tests de prolifération traditionnels qui est optimisée pour les applications d’imagerie à haut contenu. Dans ce dosage, l’EdU analogue à la thymidine modifiée est efficacement incorporé à l’ADN fraîchement synthétisé et il est marqué de façon fluorescente avec le colorant brillant et photostable Alexa Fluor™ dans une réaction clic rapide et hautement spécifique. Ce marquage fluorescent des cellules en prolifération est précis et compatible avec les méthodes d’anticorps en raison du protocole de clic doux.

Le test Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 555 HCS est :

• Simple—fonctionne la première fois, à chaque fois, en moins de temps
• Efficace—aucune étape de dénaturation ou traitement sévère requis
• Doux pour les échantillons—meilleure préservation de la morphologie cellulaire, de la structure antigénique et de l’intégrité de l’ADN
• Homogène—ne dépend pas de lots d’anticorps variables pour la détection

Les méthodes de détection de prolifération les plus précises sont basées sur l’incorporation et la mesure d’analogues nucléosidiques dans l’ADN nouvellement synthétisé, avec la bromodésoxyuridine (BrdU), un analogue couramment utilisé. L’ADN marqué par le BrdU est quantifié à l’aide d’anticorps anti-BrdU suite à la dénaturation de l’ADN par des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) afin d’exposer les molécules de BrdU. Cette étape est chronophage et difficile à réaliser de façon constante. Le traitement rigoureux peut également nuire à l’intégrité et à la qualité des échantillons, ce qui rend la co-coloration avec d’autres anticorps difficile.

Méthodologie de prolifération supérieure
Le test Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 555 HCS offre une alternative supérieure aux tests BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire. L’EdU (5-éthynyl-2’-déoxyuridine) est un analogue nucléosidique de la thymidine ; il est incorporé à l’ADN au cours de la synthèse de l’ADN active. Avec le kit Click-iT™ EdU, une fixation légère et la perméabilisation du détergent suffisent pour que le réactif de détection basé sur les petites molécules Click-iT™ EdU ait accès à l’ADN. En conséquence, le test Click-iT™ EdU HCS est non seulement facile à utiliser, mais plus précis et compatible avec l’analyse du cycle cellulaire et d’autres cibles intracellulaires ou extracellulaires pour des résultats vraiment riches en contenu.

Le kit est optimisé pour les applications d’imagerie à haut contenu ; visitez la zone technologique Click-iT™ de notre site Web pour les kits conçus pour les plateformes de microscopie à fluorescence, de microplaques ou de cytométrie en flux.

Pour en savoir plus sur la technologie Click-iT™

Remarques :
Le dosage Click-iT™ peut être utilisé sur les cellules en culture ou in vivo suite à l’administration d’EdU par des méthodes nourricières ou d’injection.
Le dosage Click-iT™ peut être utilisé avec la BrdU dans des expériences à impulsion double en utilisant l’anticorps anti-BrdU (clone MoBu-1), qui ne réagit pas de manière croisée avec l’EdU.
La technologie Click-iT™ est compatible avec les colorants immunohistochimiques, immunocytochimiques et fluorescents qui tolèrent la fixation ou qui sont conçus pour le marquage des cellules fixées.