Le kit complet de clonage par PCR TOPO™ XL-2 fournit tous les éléments nécessaires à un clonage efficace des produits de PCR extra-longs (jusqu’à 13 kb). Le kit utilise le vecteur pCR™-XL-2-TOPO™ linéarisé et activé par la topoisomérase 1, qui est compatible avec le clonage de fragments de PCR à extrémité arrondie. L’amplification de longs fragments de PCR est activée par le Master Mix pour PCR Platinum™ SuperFi™ Green, inclus dans le kit. L’activation de la topoisomérase 1 du vecteur permet aux produits de PCR d’être ligaturés en seulement 5 minutes sur votre paillasse, ce qui offre une efficacité de clonage élevée (jusqu’à 90 % de recombinants positifs avec des fragments de 10 kb).
Le vecteur pCR-XL-2-TOPO comprend :
• le gène ccdB pour la sélection positive
• le site EcoR I encadrant le site d’insertion du produit de PCR, pour une excision facile des inserts
• les gènes de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine permettant de choisir la méthode de sélection d’E coli
• le site promoteur/amorce T7 pour la transcription et le séquençage de l’ARN in vitro
• Sites d’amorce T7, T3 et M13 sens et antisens pour le séquençage
Le kit complet de clonage par PCR TOPO XL-2 comprend :
• Kits de clonage par PCR TOPO XL-2 contenant le vecteur pCR-XL-2-TOPO
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Master Mix pour PCR Platinum SuperFi Green : doté d’une ADN polymérase à activité correctrice (fidélité > 300X par rapport à Taq) à haute processivité et d’un gradient de densité pour générer des amplicons PCR longs et précis prêts pour chargement sur gel d’agarose pour extraction sur gel
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Kit mixte pour l’extraction rapide sur gel et la purification par PCR PureLink™ : conçu pour purifier les fragments d’ADN à partir de gels d’agarose ou pour la purification PCR directe à l’aide d’une cartouche de centrifugation à base de silice en moins de 30 minutes
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Cellules E coli One Shot™ OmniMAX™ 2 T1R chimiquement compétentes : une lignée cellulaire chimiquement compétente améliorée, idéale pour toutes les applications de clonage.