EZ-Link™ Maleimide Activated Horseradish Peroxidase Kit

El kit de peroxidasa de rábano activada con maleimida Thermo Scientific Pierce se utiliza para la preparación de conjugados de HRP con proteínas, péptidos u otros ligandos que contienen grupos de sulfhidrilos, como cisteínas reducidas. Es adecuado para la conjugación de 5 mg de inmunoglobulina (IgG). El kit contiene todos los tampones y una columna de desalinización de 10 ml.

Características del kit de peroxidasa de rábano activada con maleimida:

• HRP activada: peroxidasa de rábano picante (HRP) modificada con grupos maleimida para su conjugación con moléculas de sulfhidrilo
• Reactiva al sulfhidrilo: grupos maleimida conjugados con tioles reducidos (-SH), como en la cadena lateral de los residuos de cisteína
• HRP de alta actividad: la actividad enzimática es superior a 240 unidades/mg; liofilizada. La enzima activada es estable durante al menos 12 meses a 4 °C
• Kit completo: incluye la HRP activada, así como dos tipos de reactivos para los anticuerpos (IgG) listos para el sulfhidrilo o las proteínas para la conjugación

Este producto consiste en peroxidasa de rábano picante (HRP) que ha sido modificado con Sulfo-SMCC (n.º de pieza 22322) para unir varios grupos maleimida por molécula de HRP mientras se mantiene la actividad de la peroxidasa. La HRP activada se unirá covalentemente a proteínas u otras moléculas que contengan grupos sulfhidrilos (por ejemplo, cisteínas). Los conjugados de HRP de anticuerpos, proteínas, péptidos y otras sondas reporteras que contienen tiol se hacen fácilmente con este método. El kit completo incluye la HRP activada, así como dos tipos de reactivos para la preparación de anticuerpos (IgG) listos o proteínas listas para la conjugación.

El kit completo de peroxidasa de rábano picante activada por maleimida contiene reactivos para exponer o añadir los grupos sulfhidrilos necesarios en anticuerpos (IgG) o prácticamente cualquier otra proteína. Estas estrategias generales se describen brevemente en la sección de aplicaciones de nuestra revisión de la química de reacción de maleimida. Por supuesto, cualquier proteína que contenga cisteínas tiene grupos sulfhidrilos (-SH), pero deben estar reducidos (no en forma de enlaces de disulfuro) para ser conjugados. Los anticuerpos también contienen enlaces de disulfuro que pueden ser utilizados como sitios de etiquetado de anticuerpos; los enlaces de disulfuro de la región bisagra en los IgG pueden escindirse de forma selectiva con el agente reductor suave 2-Mercaptoetilamina (n.º de pieza 20408), que se incluye en el kit completo. Alternativamente, los grupos de sulfhidrilo pueden añadirse a las proteínas (o a cualquier molécula que contenga aminas) utilizando el reactivo SATA (n.º de cat. 26102), que también viene incluido en el kit.

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