细胞增殖分析对于细胞生长和分化研究至关重要,在药物开发过程中经常用于评估化合物的毒性和对肿瘤细胞生长的抑制情况。 细胞增殖检测通常是基于平均DNA含量或细胞代谢实现的。 这些检测方法可以测定总细胞数或活细胞数,或在单个细胞内测定DNA的合成情况。

我们广泛的Molecular Probes®细胞分析和荧光标记试剂可单独或配合使用,可以进行复杂的生物检测,包括使用成像、微孔板或流式细胞术检测平台研究细胞增殖、细胞毒性或药物有效性等。

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另请了解细胞增殖的流式细胞术检测

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代谢指示剂

Molecular Probes®代谢指示剂可测定细胞还原电位,可与基于荧光或吸光度的酶标仪配套使用。 激发的信号与微孔板内活细胞数成正比。

针对不同情况可选择不同的指示剂,能进行呼吸的活跃细胞将指示剂还原为产生强荧光或有色的产物; 无活性或受损的细胞,也有可能是不增殖的细胞,其还原能力下降,从而产生较低的信号。 在不同的时间点检测这些信号,就可用来评估细胞群的平均增殖率。

alamarBlue®指示剂无细胞毒性,可用于检测活细胞且不影响下游功能分析。

  alamarBlue®还原
使用alamarBlue®指示剂监测生长抑制剂的效率

DNA含量

CyQUANT®细胞增殖检测提供了一种准确的基于细胞DNA含量的微孔板荧光检测方法,用于对细胞群进行计数。 因为单个细胞DNA含量是高度保守的,在多个时间点进行CyQUANT®检测就能计算出细胞群的平均增殖率。 而且CyQUANT®染料与DNA的结合与细胞代谢状态无关,所以可以在一定范围内和细胞类型间比较信号大小和荧光强度。

有多种CyQUANT®检测形式可供不同工作流程选择,包括对总细胞数和活细胞数的多天检测和终点检测。

  CyQUANT® 细胞增殖分析试剂盒
使用CyQUANT®细胞增殖分析试剂盒对NIH 3T3纤维细胞进行定量分析。

新DNA合成——成像/高内涵分析

检测新合成DNA是一种准确分析单个细胞或细胞群细胞增殖的方法。 Click-iT® EdU分析是一种基于检测核酸类似物EdU整合到DNA内的情况来测定新DNA合成率的方法。 检测需要通过铜催化的“click”反应来完成,通常需要30分钟。

Click-iT® EdU成像分析反应条件温和,而且可选择一系列非常明亮的Alexa Fluor®作染料,使得这些DNA合成检测试剂兼容性好且获得内容更丰富的结果。 该试剂盒适用于培养的细胞或组织切片,可用于荧光显微镜检测,也可进行微孔板HCS分析或进行细胞裂解液微孔板检测。

  Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647
用抗β-微管蛋白抗体标记并使用 Alexa Fluor® 488羊抗小鼠二抗Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647染色的BPAE细胞。

新DNA合成——HTS分析

Click-iT®EDU微孔板检测是一种优化的,基于微孔板荧光分析的,简单而快速的工作流程。

此检测中,经过修饰的胸苷类似物EdU被有效整合到新合成的DNA内,而且被明亮的、具有光稳定性的Amplex® UltraRed染料通过快速、高度特异性的链接反应标记。 这种对增殖细胞的荧光标记快速且准确,其减少了洗涤步骤,而且比传统的BrdU比色或荧光细胞增殖检测方法节约了25%(或更多)的时间。

可以通过检测荧光或吸光度获得多功能的红色荧光Amplex® UltraRed试剂的读值。

  Click-iT® EdU微孔板分析
使用Click-iT® EdU微孔板分析对阿非迪霉素处理的细胞进行增殖检测。

细胞增殖产品选择指南

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数)而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

  alamarBlue®指示剂 XTT (2,3-Bis-(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)-2H-Tetrazolium-5-Carboxanilide) Vybrant® MTT细胞增殖检测试剂盒(1,000次)
检测的基本原理 测定细胞还原电位;信号与活细胞数量成正比
读值 来自完整细胞或裂解液的荧光或比色信号 细胞裂解液比色读值
荧光标记 刃天青 XTT/甲臜 MTT/甲臜
荧光/吸光度 FL 571/585 nm ABS ABS
参考文献 引文 引文 引文
多重
形式 25 mL 100 mL 100 mg 10 plates/ kit
目录号 DAL1025 DAL1100 X6493 V13154

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数),而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

 
检测的基本原理 基于DNA含量检测细胞数量;其读值不受代谢状态影响
读值 在多点检测过程中培养的细胞必须冻存,而且要与通用标准品一起进行分析。 用于快速读值的简化方案;无冻存步骤;从检测开始到结束仅需1小时 15分钟方案;无需冻存、裂解或温度平衡;活性指示剂(如:不对死细胞计数)
检测范围 50–50,000细胞 100–20,000细胞 50–20,000细胞
荧光标记 CyQUANT® GR CyQUANT® NF CyQUANT® Direct
标准滤光片 FITC
参考文献 引文
Top/bottom读数 两者皆可 两者皆可 bottom读取
多重
形式 1000次检测/kit 200次检测/kit 10 plates/ kit
目录号 C7026 C35006 C35011

Click-iT® EdU检测试剂盒为在短短90分钟内完成对增殖细胞中DNA复制的分析提供了简单、稳定的方法。 此类试剂盒可用于显微成像或HCS,也可以选择不同荧光染料用于多色分析。

专门优化用于荧光显微

  Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 555成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 594成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647成像试剂盒
检测的基本原理 经过修饰的胸苷类似物EdU可整合到新合成的DNA内, 使用明亮、稳定的Alexa Fluor®染料,以一种快速、高特异性的click反应对细胞进行标记。
读值 当EdU孵育时,荧光信号会积累在DNA合成的细胞核内
荧光标记 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor® 555 Alexa Fluor® 594 Alexa Fluor® 647
标准滤光片 FITC TRITC Texas Red® Cy®5
激发/发射波长(nm) 495/519 555/565 590/617 650/668
信噪比 5星 5星 5星 5星
光稳定性 4星 5星 5星 5星
参考文献 引文
多重 基于click chemistry®的温和方法不会破坏细胞表位(这与BrdU方法不同)而且与抗体标记及一般的细胞成像或组织染色方法相兼容。
形式 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit
目录号 C10337 C10338 C10339 C10340

 

专门优化用于微孔板HCS分析

  Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 555 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 594 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647 HCS分析
基本原理 经过修饰的胸苷类似物EdU可整合到新合成的DNA内, 使用明亮、稳定的Alexa Fluor®染料,以一种快速、高特异性的click反应对细胞进行标记。
读值 当EdU孵育时,荧光信号会积累在DNA合成的细胞核内
荧光标记 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor® 555 Alexa Fluor® 594 Alexa Fluor® 647
标准滤光片 FITC TRITC Texas Red® Cy®5
激发/发射波长(nm) 495/519 555/565 590/617 650/668
信噪比 5星 5星 5星 5星
光稳定性 4星 5星 5星 5星
参考文献 引文
多重 基于click chemistry®的温和方法不会破坏细胞表位(这与BrdU方法不同)而且与抗体标记及一般用于HCS的细胞或组织染色方法相兼容。 试剂可直接加入到细胞培养基中
形式 2 板 10 板 2 板 10 板 2 板 10 板 2 板 10 板
目录号 C10350 C10351 C10352 C10353 C10354 C10355 C10356 C10357

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数)而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

 
检测的基本原理 检测新合成的DNA(如:分裂的细胞)
读值 随着新DNA的合成信号增加;可以通过荧光或吸光度检测
荧光标记 Amplex® UltraRed
标准滤光片 罗丹明
参考文献 引文
多重
活细胞
固定细胞
形式 4 plates/kit
目录号 C10214

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数)而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

  alamarBlue®指示剂 XTT (2,3-Bis-(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)-2H-Tetrazolium-5-Carboxanilide) Vybrant® MTT细胞增殖检测试剂盒(1,000次)
检测的基本原理 测定细胞还原电位;信号与活细胞数量成正比
读值 来自完整细胞或裂解液的荧光或比色信号 细胞裂解液比色读值
荧光标记 刃天青 XTT/甲臜 MTT/甲臜
荧光/吸光度 FL 571/585 nm ABS ABS
参考文献 引文 引文 引文
多重
形式 25 mL 100 mL 100 mg 10 plates/ kit
目录号 DAL1025 DAL1100 X6493 V13154

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数),而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

 
检测的基本原理 基于DNA含量检测细胞数量;其读值不受代谢状态影响
读值 在多点检测过程中培养的细胞必须冻存,而且要与通用标准品一起进行分析。 用于快速读值的简化方案;无冻存步骤;从检测开始到结束仅需1小时 15分钟方案;无需冻存、裂解或温度平衡;活性指示剂(如:不对死细胞计数)
检测范围 50–50,000细胞 100–20,000细胞 50–20,000细胞
荧光标记 CyQUANT® GR CyQUANT® NF CyQUANT® Direct
标准滤光片 FITC
参考文献 引文
Top/bottom读数 两者皆可 两者皆可 bottom读取
多重
形式 1000次检测/kit 200次检测/kit 10 plates/ kit
目录号 C7026 C35006 C35011

Click-iT® EdU检测试剂盒为在短短90分钟内完成对增殖细胞中DNA复制的分析提供了简单、稳定的方法。 此类试剂盒可用于显微成像或HCS,也可以选择不同荧光染料用于多色分析。

专门优化用于荧光显微

  Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 555成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 594成像试剂盒 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647成像试剂盒
检测的基本原理 经过修饰的胸苷类似物EdU可整合到新合成的DNA内, 使用明亮、稳定的Alexa Fluor®染料,以一种快速、高特异性的click反应对细胞进行标记。
读值 当EdU孵育时,荧光信号会积累在DNA合成的细胞核内
荧光标记 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor® 555 Alexa Fluor® 594 Alexa Fluor® 647
标准滤光片 FITC TRITC Texas Red® Cy®5
激发/发射波长(nm) 495/519 555/565 590/617 650/668
信噪比 5星 5星 5星 5星
光稳定性 4星 5星 5星 5星
参考文献 引文
多重 基于click chemistry®的温和方法不会破坏细胞表位(这与BrdU方法不同)而且与抗体标记及一般的细胞成像或组织染色方法相兼容。
形式 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit 50–250盖玻片/kit
目录号 C10337 C10338 C10339 C10340

 

专门优化用于微孔板HCS分析

  Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 555 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 594 HCS分析 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 647 HCS分析
基本原理 经过修饰的胸苷类似物EdU可整合到新合成的DNA内, 使用明亮、稳定的Alexa Fluor®染料,以一种快速、高特异性的click反应对细胞进行标记。
读值 当EdU孵育时,荧光信号会积累在DNA合成的细胞核内
荧光标记 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor® 555 Alexa Fluor® 594 Alexa Fluor® 647
标准滤光片 FITC TRITC Texas Red® Cy®5
激发/发射波长(nm) 495/519 555/565 590/617 650/668
信噪比 5星 5星 5星 5星
光稳定性 4星 5星 5星 5星
参考文献 引文
多重 基于click chemistry®的温和方法不会破坏细胞表位(这与BrdU方法不同)而且与抗体标记及一般用于HCS的细胞或组织染色方法相兼容。 试剂可直接加入到细胞培养基中
形式 2 板 10 板 2 板 10 板 2 板 10 板 2 板 10 板
目录号 C10350 C10351 C10352 C10353 C10354 C10355 C10356 C10357

微孔板检测提供的是细胞群体的增殖信息(如:总细胞数)而不能提供单一细胞或亚细胞群数据。

 
检测的基本原理 检测新合成的DNA(如:分裂的细胞)
读值 随着新DNA的合成信号增加;可以通过荧光或吸光度检测
荧光标记 Amplex® UltraRed
标准滤光片 罗丹明
参考文献 引文
多重
活细胞
固定细胞
形式 4 plates/kit
目录号 C10214