Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 647 Imaging Kit

Description

Les kits d’imagerie Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® ont été optimisés pour les applications de microscopie par fluorescence et offrent une alternative supérieure aux dosages de prolifération traditionnels. Dans ce dosage, l’analogue de thymidine modifiée EdU (5-éthynyl-2’-désoxyuridine, un analogue nucléosidique de la thymidine) est efficacement incorporé à l’ADN fraîchement synthétisé et il est marqué de façon fluorescente à l’aide du colorant brillant et photostable Alexa Fluor® dans une réaction clic modérée, rapide et hautement spécifique.

• Simple : fonctionne dès la première fois, à chaque fois et en moins de temps que les méthodes traditionnelles
• Efficace : aucune étape de dénaturation ou de traitement agressif requise
• Résultats riches de contenu : meilleure conservation de la morphologie des cellules, de la structure des antigènes, du signal fluorescent de GFP et de l’intégrité de l’ADN
• Constant : la détection n’est pas dépendante des lots d’anticorps variables

Le kit contient tous les composants nécessaires au marquage et à la détection des EdU incorporés ainsi qu’à l’analyse du cycle cellulaire sur des échantillons de cellules adhérentes. Pour l’analyse du cycle cellulaire, le kit contient un colorant fluorescent bleu Hoechst 33342. Le kit contient suffisamment de réactif pour marquer 50 lamelles de 18 x 18 en utilisant 500 µl de tampon de réaction par test.

Évitez les traitements agressifs associés à la méthode BrdU
La mesure des changements de la prolifération cellulaire est une méthode fondamentale pour apprécier la santé des cellules, déterminer la génotoxicité et évaluer les médicaments anticancéreux. Pour cela, la méthode la plus précise consiste à mesurer directement la synthèse de l’ADN. La méthode traditionnelle consiste à utiliser l’analogue de nucléoside BrdU (5-bromo-2’-désoxyuridine, un analogue nucléosidique de la thymidine), qui est incorporé dans l’ADN nouvellement transcrit. Après incorporation, les échantillons sont soumis à des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) pour dénaturer l’ADN et exposer les molécules de BrdU aux anticorps anti-BrdU. Cependant la méthode BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire est chronophage et difficile à réaliser de façon systématique. Les traitements agressifs sous-tendant cette méthode peuvent affecter l’intégrité de l’échantillon, la morphologie cellulaire, la qualité de l’image et la capacité au multiplexage.

Le dosage Click-iT® Plus EdU mesure le taux de synthèse de l’ADN basé sur l’incorporation de l’analogue nucléosidique EdU à l’ADN. La détection est obtenue par une réaction catalysée de type “clic” qui est achevée généralement en 30 minutes. La réaction clic utilise des groupes bioorthogonaux (biologiquement uniques) pour marquer de manière fluorescente les cellules en cours de prolifération, produisant un faible bruit de fond et une sensibilité de détection très élevée. Grâce aux conditions de réaction douces, les dosages Click-iT® Plus peuvent évaluer précisément la prolifération cellulaire tout en préservant la morphologie cellulaire, l’intégrité de l’ADN, les sites de liaison de l’antigène et le signal fluorescent de GFP. La préservation de l’intégrité de l’ADN permet sa coloration, notamment la coloration avec des colorants utilisés pour l’analyse du cycle cellulaire.

Figures

Spécifications

For Use With (Equipment):	Fluorescence Microscope
Detection Method:	Fluorescent
Format:	Vial(s)
Label or Dye:	Alexa Fluor™ 647
Product Line:	Click-iT™
Product Size:	1 kit

Contenu et stockage