Mem-PER™ Plus Membrane Protein-Extraktions-Kit

Das Thermo Scientific Mem-PER Plus Membranprotein-Extraktionskit ermöglicht die Lösungsbilisierung und Anreicherung von integrierten Membranproteinen und membranassoziierten Proteinen in kleinem Maßstab in einem einfachen reagenzienbasierten Verfahren.

Merkmale des Mem-PER Plus Kits:

• Extraktion und Isolierung—Erzeugt minimale Kreuzkontamination (normalerweise weniger als 10 %) von zytosolischem Protein in die Membranproteinfraktion
• Zellen oder Gewebe—Für die effektive Extraktion aus kultivierten Säugetierzellen und Säugetiergewebe
• Kompatibilität mit Anschlussverfahren—Analyse von Membranproteinextrakten durch SDS-PAGE, Western Blotting, Immunpräzipitation und Proteinassays
• Schnell und einfach—Isolierung von Membranproteinen in ca. einer Stunde
• Keine spezielle Ausrüstung erforderlich—Nur eine Tischmikrozentrifuge, Röhrchen, Homogenisatoren und Pipettierer erforderlich

Das Mem-PER Plus Kit isoliert Membranproteine effektiv von kultivierten Zellen und Geweben mit einem einfachen Tischmikrozentrifugenverfahren. Integrale Membranproteine, die eine oder zwei Transmembrandomänen haben, werden effektiv solubilisiert und von zytosolischen Proteinen isoliert. Mit dem Kit können integrale und periphere Membranproteine aus Säugerzellkulturen sowie aus harten und weichen Säugergeweben extrahiert und selektiv angereichert werden. Das MEM-PER Plus Kit hat viele Vorteile im Vergleich zu unserem ursprünglichen Mem-PER Kit. Das Protokoll ist einfacher, und die Fraktionen sind direkt kompatibel mit vielen nachgelagerten Anwendungen wie SDS-PAGE, Western Blotting, BCA, Immunpräzipitation und aminreaktiven Proteinmarkierungsverfahren.

Im Lieferumfang enthalten:
Das Kit enthält eine Zellwaschlösung, einen Permeabilisationspuffer und einen Lösungspuffer.

Herkömmliche Methoden zur Isolierung von Membranproteinen sind mühsam und zeitaufwändig und erfordern Gradiententrennung und teure Ultrazentrifugationsgeräte. Das Mem-PER Plus Membran Protein Extraction Kit dient zur Anreicherung von integralen Membranproteinen und Membran-assoziierten Proteinen aus kultivierten Säugerzellen oder -gewebe mit einem milden Detergens-basierten selektiven Extraktionsprotokoll. Durch die Verwendung der selektiven Reinigungsmittelextraktion entfällt die aufwändige Phasentrennung aufgrund der Hydrophobizität, was eine bessere Reproduzierbarkeit und einen höheren Durchsatz ermöglicht.

Die Zellen werden zuerst mit einem milden Reinigungsmittel permeabilisiert, wodurch lösliche zytosolische Proteine freigestellt werden, nach denen ein zweites Reinigungsmittel Membranproteine auflöst. Effizienz und Ertrag der Extraktion variieren je nach Zelltyp. Außerdem hängen sie davon ab, wie oft das integrale Membranprotein die Doppellipidschicht umspannt. Membranproteine mit ein oder zwei Transmembrandomänen werden i. d. R. mit einem Wirkungsgrad von bis zu 90 % extrahiert. Die Kreuzkontamination von zytosolischen Proteinen in die Membranfraktion beträgt in der Regel weniger als 10 %.

Weitere Produktdaten
• Effiziente Extraktion von Membranproteinen bei Säugetieren

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