Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix
Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix
Invitrogen™

Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix

Invitrogen Platinum SuperFi II Green PCR-Mastermix (2x) enthält ein gebrauchsfertiges Gemisch aus Platinum SuperFi II DNA-Polymerase, Platinum SuperFi II BufferWeitere Informationen
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KatalognummerFarbeAnzahl Reaktionen
12368050Colorless500 Reaktionen
12369010Green100 Reaktionen
12369050Green500 Reaktionen
12369250Green5 x 500 Reaktionen
12368010Colorless100 Reaktionen
12368250Colorless5 x 500 Reaktionen
Katalognummer 12368050
Preis (EUR)
1.428,65
온라인 행사
1.534,00
Ersparnis 105,35 (7%)
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Farbe:
Colorless
Anzahl Reaktionen:
500 Reaktionen
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Invitrogen Platinum SuperFi II Green PCR-Mastermix (2x) enthält ein gebrauchsfertiges Gemisch aus Platinum SuperFi II DNA-Polymerase, Platinum SuperFi II Buffer und dNTPs für eine bequeme PCR-Vorbereitung sowie zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele. Platinum SuperFi II DNA-Polymerase ist eine Proofreading-DNA-Polymerase, die überlegene Genauigkeit mit dem innovativen SuperFi II Puffer kombiniert, um durch ein universelles Primer-Annealing für optimale Erfolgsraten in der PCR zu sorgen. Ideal für Klonierung, Mutagenese und andere Anwendungen, die von höchster Sequenzgenauigkeit profitieren.

Zu den Merkmalen des Platinum SuperFi II Green PCR Master Mix gehören:
• Außergewöhnliche >300X Taq-Genauigkeit
• Universelles Primer-Glühen bei 60 °C
• Hervorragende Spezifität, Empfindlichkeit und Ausbeute
• Robuste Amplifikation von schwer zu amplifizierenden Zielen (z. B. solche mit suboptimaler Reinheit oder mit einem GC-Gehalt von ˃ 65 %, Bedarf an langer PCR)

Platinum SuperFi DNA-Polymerase ist ein speziell entwickeltes Enzym mit hoher Prozessivität und erhöhter Resistenz gegen PCR-Inhibitoren. Sie ermöglicht auch schnelle Protokolle und Amplifikation langer Zielsegmente (bis zu 20 kb). Die Platinum Heißstart-Technologie basiert auf firmeneigenen Antikörpern, die die Enzymaktivität bis zum ersten PCR-Denaturierungsschritt hemmen und unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau verhindern. Diese Technologie ermöglicht zudem ein Ansetzen der Reaktion bei Raumtemperatur und sorgt für eine höhere Empfindlichkeit und Ausbeute.

Aufgrund der einzigartigen Zusammensetzung des SuperFi II PCR-Puffers beträgt die Annealing-Temperatur für die meisten Primerpaare, die gemäß den allgemeinen Konstruktionsregeln hergestellt wurden, 60 °C. Isostabilisierende Moleküle im Puffer erhöhen die Duplexstabilität des Primer-Templates während des Glühschritts und tragen zu einer verbesserten Spezifität bei, ohne dass die Glühtemperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Mit der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase können verschiedene PCR-Assays unter Verwendung desselben Protokolls mit universeller Primer-Annealing-Temperatur und dem Extensions-Schritt, der für das längste zu amplifizierende Fragment ausgewählt wurde, zusammen durchgeführt werden.

Anwendungen der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase:
• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung und Subklonierung
• Ortsspezifische Mutagenese
• Amplifikation von GC-reichen Templates
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Hochdurchsatz-PCR
• Amplifikation von Proben mit suboptimalem Reinheitsgrad
• Long-Range-PCR
• Schnelle PCR

Ebenfalls erhältlich ist der Platinum SuperFi II PCR Master Mix. Dabei handelt es sich um denselben Master Mix, jedoch ohne Tracking-Farbstoffe.

Weitere Informationen zu Platinum SuperFi II DNA-Polymerase-Produkten ›
Specifications
FarbeColorless
Wiedergabetreue (vs. Taq)>300X
Hot-StartIntegrierter Heißstart
Anzahl Reaktionen500 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePlatinum SuperFi II DNA-Polymerase
ProdukttypPCR-Mastermix
Menge500 reactions
ReaktionsformatSuperMix oder Master Mix
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Konzentration2X
Zur Verwendung mit (Anwendung)Heißstart-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 10 x 1,25 ml Platinum SuperFi II PCR Master Mix
• 10 x 1,25 ml Wasser, Nuklease-frei

Ausreichend für 500 50-µl-Reaktionen

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How much volume of the Platinum SuperFi II PCR Master Mix (2X) or Platinum SuperFi II PCR Green Master Mix (2X) should I use per reaction?

Typically, for a 50 µL PCR reaction, we recommend using 25µµL of the 2X master mix so that its final concentration in the reaction is 1X.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What are your recommendations when working with long amplicons using Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Good lab practices are important for long fragment amplification. These include using high-quality templates (pure, fresh, and intact) and fresh primer solutions. Reducing primer concentration to 0.2 µM may also improve the results.

Can I use Platinum SuperFi DNA Polymerase cycling protocol and primer annealing temperature with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Yes, Platinum SuperFi II DNA Polymerase works at both universal 60 degrees C annealing temperature and at annealing temperatures calculated with a Tm calculator.

Can I perform TA cloning with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Platinum SuperFi II DNA Polymerase produces blunt-ended PCR products that can be cloned directly into blunt-ended cloning vectors. TA cloning is also possible if 3' dA-overhangs are added after PCR. We recommend purifying the PCR products of Platinum SuperFi DNA Polymerase before adding the overhangs. The procedure for adding 3' dA-overhangs (TA cloning) includes the following steps:
- Purify the PCR product (e.g., with a PCR purification kit or phenol extraction/DNA precipitation). Before adding the overhangs, PCR product must be purified, as the strong proofreading activity of any remaining Platinum SuperFi DNA Polymerase will degrade the added 3' dA-overhangs.
- Perform 3' dA addition with a Taq DNA polymerase.
Reaction components:
Purified PCR product
0.2 mM dATP
1x Taq Buffer
1 U Taq DNA Polymerase
Incubate the reaction for 20 min at 72 degrees C.
- Proceed to TA cloning. For optimal ligation efficiency, we recommend using fresh PCR products, since 3' dA-overhangs can be lost during storage

Can I perform restriction digestion in the Platinum SuperFi II reaction buffer?

Platinum SuperFi II reaction buffer is compatible with restriction digestion directly after PCR. Note that Platinum SuperFi II DNA Polymerase is not inactivated during PCR, thus purification of PCR products before restriction digestion is recommended if intact 5'- or 3'- overhangs are needed for cloning.

Zitierungen und Referenzen (14)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
A PCR amplicon-based SARS-CoV-2 replicon for antiviral evaluation.
Authors:Kotaki T, Xie X, Shi PY, Kameoka M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33500537
'The development of specific antiviral compounds to SARS-CoV-2 is an urgent task. One of the obstacles for the antiviral development is the requirement of biocontainment because infectious SARS-CoV-2 must be handled in a biosafety level-3 laboratory. Replicon, a non-infectious self-replicative viral RNA, could be a safe and effective tool for ... More
Engineering SARS-CoV-2 using a reverse genetic system.
Authors:Xie X, Lokugamage KG, Zhang X, Vu MN, Muruato AE, Menachery VD, Shi PY
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:33514944
'Reverse genetic systems are a critical tool for studying viruses and identifying countermeasures. In response to the ongoing COVID-19 pandemic, we recently developed an infectious complementary DNA (cDNA) clone for severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). The reverse genetic system can be used to rapidly engineer viruses with desired ... More
The analysis of GSTA1 promoter genetic and functional diversity of human populations.
Authors:Mlakar V, Curtis PH, Armengol M, Ythier V, Dupanloup I, Hassine KB, Lesne L, Murr R, Mlakar SJ, Nava T, Ansari M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33658540
'GSTA1 encodes a member of a family of enzymes that function to add glutathione to target electrophilic compounds, including carcinogens, therapeutic drugs, environmental toxins, and products of oxidative stress. GSTA1 has several functional SNPs within its promoter region that are responsible for a change in its expression by altering promoter ... More
Epigallocatechin-3-gallate Alleviates Vanadium-Induced Reduction of Antioxidant Capacity via Keap1-Nrf2-sMaf Pathway in the Liver, Kidney, and Ovary of Laying Hens.
Authors:Ma Y, Shi Y, Wu Q, Ma W
Journal:Biol Trace Elem Res
PubMed ID:33405082
'This study evaluated the effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG) alleviating the reduction of antioxidant capacity induced by dietary vanadium (V) in the liver, kidney, and ovary of laying hens. Furthermore, Kelch-like ECH-associated protein 1(Keap1)-nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)-small Maf proteins (sMaf) pathway was explored to reveal the molecular mechanism. ... More
Human Ubiquitin-Specific Peptidase 18 Is Regulated by microRNAs
Authors:Rubino E, Cruciani M, Tchitchek N, Le Tortorec A, Rolland AD, Veli Ö, Vallet L, Gaggi G, Michel F, Dejucq-Rainsford N, Pellegrini S
Journal:Front Genet
PubMed ID:33633774
'Ubiquitin-specific peptidase 18 (USP18) acts as gatekeeper of type I interferon (IFN) responses by binding to the IFN receptor subunit IFNAR2 and preventing activation of the downstream JAK/STAT pathway. In any given cell type, the level of USP18 is a key determinant of the output of IFN-stimulated transcripts. How the ... More