T4-DNA-Polymerase ist eine DNA-Polymerase, die eine 3´-Exodesoxyribonuklease-Aktivität, jedoch keine 5´a3´-Exodeoxyribonuklease-Aktivität aufweist. Ein technisches Informationsblatt zu T4-DNA-Ligase ist verfügbar.

Anwendungen: Kennzeichnung doppelsträngiger linearer DNA durch Ersatzsynthese (1). Oligonukleotid-gerichtete, ortsspezifische Mutagenese (2). 3´ Endmarkierung von doppelsträngiger DNA (3). Polieren von 5´ oder 3 Überhängen, um stumpfe Enden (4) zu bilden.

Quelle: Aufgereinigt aus E. coli , mit Exprimierung des T4-DNA-Polymerase-Gens auf einem Plasmid

Leistungs- und Qualitätskontrolle: Ein- und doppelsträngige Endodeoxyribonuklease- und Phosphatase-Assays; Exodeoxyribonuklease- und Polymerase-Aktivitäten getestet

Einheiten-Definition: Eine Einheit integriert in 30 min bei 37 °C mit DNase I-Nick-DNA als Template-Primer •10 nMol Gesamt-Desoxyribonukleotid in säurefällbares Material

Reaktionsbedingungen der Einheit: 50 mM Glycin-NaOH (pH 8,8), 16,6 mM (NH₄)₂SO₄ , 6 mM MgCl₂, 6,5 µM EDTA, 10 mM 2-Mercaptoethanol, 0,165 mg/ml BSA, 1,6 mg/ml DNase I-Nick-Lachshoden-DNA, 0,33 mM dCTP, 0,33 mM dATP, 0,33 mM dGTP, 0,33 mdTTP, 76 nM [³H]dTTP und Enzym in 0,1 ml für 30 min bei 37 °C.