Verwenden Sie Thermo Scientific Pierce Recombinant Peroxidase Conjugated Protein A, um Kaninchen- und menschliche Antikörper, insbesondere IgG-Isotypen, in Western-Blotting-, ELISA-, IHC- und anderen Immunassay-Protokollen zu untersuchen und nachzuweisen.

Merkmale von Recombinant Peroxidase Conjugated Protein A:

• Enthält vier Fc-bindende Domänen pro Protein
• Besser als Protein G für polyklonales IgG aus Kaninchen-, Schwein-, Hund- und Katzenserum
• Schlechter als Protein G für Maus-IgG1, humanes IgG3 und Ratten-, Ziegen- und Kuhantikörper

Protein A ist eine Zellwandkomponente, die von mehreren Staphylococcus-aureus-Stämmen erzeugt wird und aus einer einzelnen Polypeptidkette besteht und wenig oder kein Kohlenhydrat enthält. Rekombinantes Protein A wird in E. coli hergestellt und funktioniert im Wesentlichen genauso wie natives Protein A. Das Protein-A-Molekül enthält vier Bindungsstellen mit hoher Affinität, die mit der Fc-Region von IgG verschiedener Spezies, einschließlich Mensch und Kaninchen, interagieren können. Die optimale Bindung erfolgt bei pH 8,2, obwohl die Bindung auch bei neutralen oder physiologischen Bedingungen (pH 7,0 bis 7,6) wirksam ist.

Eigenschaften von Recombinant Protein A:
• Quelle: E. coli
• Molekulargewicht: ∼44.600 (anscheinendes MW nach SDS-PAGE: 45.000)
• Form: Salzfreies Pulver
• A280 von 0,1 % Lösung: ∼0,165
• Isoelektrischer Punkt (pI): 4,7 bis 4,8

Die Wechselwirkung zwischen Protein A und IgG ist nicht bei allen Spezies gleich. Auch innerhalb einer Spezies interagiert Protein A mit einigen Subklassen von IgG und nicht mit anderen. Zum Beispiel binden humanes IgG1, IgG2 und IgG4 stark, während IgG3 nicht bindet. Es gibt auch viele Fälle, in denen monoklonale Antikörper nicht an Protein A binden, insbesondere die Mehrheit der Immunglobuline von Ratten und Maus-IgG1.

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