Das Pierce Coomassie (Bradford) Proteinassay-Kit ist eine gebrauchsfertige, stabile Formulierung des herkömmlichen Bradford-Assay-Reagenz zur Messung der Gesamtproteinkonzentration im Vergleich zu einem Proteinstandard. Das Kit enthält Coomassie-Proteinassay-Reagenz und ein Paket mit Albumin Standard-Ampullen.
Vergleich aller erhältlichen Bradford-Assays ›Das Pierce Coomassie Proteinassay-Kit ist eine gebrauchsfertige Formulierung des beliebten Assay-Reagenz, das ursprünglich 1976 von Bradford beschrieben wurde. Beim Mischen mit einer Proteinlösung verfärbt sich das saure Coomassie-Farbstoffreagenz proportional zum Verhältnis der Menge des in der Probe vorhandenen Proteins von braun nach blau. Die Ermittlung des Proteingehalts erfolgt durch Vergleich der Farbe mit Protein-Assaystandards, die in der Regel aus einer Reihe bekannter Verdünnungen von Rinderserumalbumin (BSA) oder Rindergammaglobulin (BGG) gewonnen werden. Das einfache Verfahren lässt sich an nahezu alle Volumenskalen einschließlich Reagenzgläser, Küvetten und Mikrotiterplatten anpassen. Der Proteinassay ist mit den meisten Salzen, Lösungsmitteln, Puffern, Thiolen, Reduktionsstoffen und Metallchelatmitteln, die in Proteinproben vorkommen, kompatibel.
Merkmale des Coomassie-Proteinassay-Kits:
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Bradford Reagenz — stabiles, gebrauchsfertiges Kit des klassischen Bradford-Assay-Reagenz
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Kolorimetrisch — mit einem Standard-Spektralphotometer oder Plattenlesegerät bei 595 nm messen
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Einfache Verwendung — Einzelreagenz; keine Reagenzienvorbereitung erforderlich
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Schnell — beinahe sofortige Farbentwicklung; hinzufügen, mischen und Ergebnisse ablesen
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Assay-Bereich — weist Proteinkonzentration im Bereich von 1 bis 1500 µg/ml nach
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Flexibel —Mikrotiterplatte und Küvettenprotokolle werden mitgeliefert und sind an mehrere Zielarbeitsbereiche anpassbar
Wie der Coomassie (Bradford) Assay Proteine erkenntAusbildung von Farbe in Coomassie Farbstoff-basierten (Bradford) Proteinassays ist mit der Anwesenheit bestimmter Aminosäuren (hauptsächlich Arginin, Lysin und Histidin) im Protein in Verbindung gebracht worden. Van-der-Waals-Kräfte und hydrophobe Wechselwirkungen sind ebenfalls an der Bindung des Farbstoffs am Protein beteiligt. Die Anzahl an jedem Proteinmolekül gebundener Coomassie-Farbstoff-Liganden ist ungefähr proportional zur Anzahl positiver Ladungen auf dem Protein. Freie Aminosäuren, Peptide und Proteine mit niedrigem Molekulargewicht erzeugen keine Farbe mit Coomassie-Farbstoff-Reagenzien. Im Allgemeinen muss die Masse eines Peptids oder Proteins mindestens 3.000 Dalton betragen, um mit diesem Reagenz getestet zu werden.
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