Das Pierce Silberfärbemittel für die Massenspektrometrie ist ein komplettes Kit für die schnelle und ultraempfindliche Silberfärbung von Proteinen in Polyacrylamidgelen und die effiziente Entfärbung von herausgefilterten Gelteilen für die Massenspektrometrieanalyse. Dieses Kit ermöglicht sowohl Erstanwendern als auch erfahrenen Anwendern eine konsistente und zuverlässige Färbung mit hohem, niedrigem und steigendem Prozentsatz an Gelen in 1D- und 2D-Formaten. Die optimierte Färbemethode gewährleistet eine äußerst empfindliche Färbung und minimiert gleichzeitig die kovalente Vernetzung von Proteinen mit der Gelmatrix, wodurch die Proteinrückgewinnung gehemmt werden kann. Die Entfärbungsreagenzien erleichtern die vollständige Entfernung von Silber aus gefärbten Proteinbanden und die maximale Proteinrückgewinnung für die anschließende Massenspektrometrieanalyse.

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Merkmale:
• Empfindlichkeit—0,25 ng pro Fleck in 30 Minuten nach der Fixierung
• Mit MS kompatibel – Reagenzien und Protokolle sind optimiert, um nach Extraktion von Peptiden aus gefärbten 1D- oder 2D-Gelen (SDS-PAGE) eine hervorragende Leistung in der Massenspektrometrie zu bieten
• Flexibles Färbeprotokoll – Gel für 15 bis 30 Minuten oder über Nacht ohne Auswirkung auf die Färbeleistung fixieren; Färbung für 1 bis 30 Minuten (normalerweise 2 bis 3 Minuten)
• Kompatibilität – effektive Silberfärbung für selbst schwer färbbare Basisproteine wie Lysozym (pI 10) und Chymotrypsinogen A (pI 9,2), die bei 0,2 ng bzw. 0,5 ng nachweisbar sind
• Vollständiges Kit – Enthält alle Reagenzien, die für die Färbung und Entfärbung vor der In-Gel-Proteolyse und Peptid-Rückgewinnung für die Analyse mittels Massenspektrometrie erforderlich sind

Bei der Silberfärbung werden in der Regel entweder Glutaraldehyd oder Formaldehyd verwendet, was in einigen Fällen zu einer kovalenten Vernetzung von Proteinen untereinander und mit der Gelmatrix führen kann. Diese Vernetzung hemmt die anschließende Extraktion oder Elution des Proteins aus dem Gel. Pierce Silberfärbemittel verwendet Formaldehyd in den Arbeitslösungen für Färbemittel und Entwickler. Das Verfahren, das gemeinsam mit dem Kit für die Massenspektrometrie verwendet wird, ist jedoch optimiert, um die Polypeptidrückgewinnung zu maximieren, ohne dabei die Empfindlichkeit zu beeinträchtigen.