Thermo Scientific Pierce Glutathione Superflow Agarose besteht aus Beads aus quervernetzter, 6%iger Agarose mit daran immobilisiertem Glutathion und ist für hochreine Aufreinigungen von Proteinen mit GST-Tags im großen Maßstab vorgesehen.

Merkmale von Glutathione Superflow Agarose:

• Hochdynamische Bindungskapazität – Bindet 10 mg reinen GST pro Milliliter Harz bei einer linearen Flussrate von 150 cm/Stunde; kann mehr als 20 mg/ml bei einer Flussrate von 30 cm/Stunde binden
• Hohe Reinheit – Bietet mehr als 90 % Reinheit, wenn sie zur Reinigung von überexprimierten GST- oder GST-Fusionsproteinen aus Lysaten verwendet wird
• Robust – Träger mit Beads aus hochvernetzter, 6%iger Superflow Agarose toleriert lineare Flussraten von bis zu 1.200 cm/Stunde
• Kompatibel – Bleibt nach Exposition gegenüber einer Vielzahl von Chemikalien und pH-Bedingungen funktionsfähig
• Kosteneffektiv – Harz bleibt über mehrere Reinigungs- und Wiederverwendungszyklen hinweg stabil

Pierce Glutathione Superflow Agarose ist ein stark vernetztes, langlebiges Harz, das bei den Flussraten im Rahmen einer FPLC-Reinigung in mittlerem bis großen Maßstab nicht komprimiert wird. Das Harz ist gegen eine Reihe von Chemikalien und pH-Werten beständig und kompatibel mit häufigen In-situ-Reinigungsverfahren. Die spezifische Bindung von Glutathion an den GST-Tag führt zu hoher Reinheit und hohen Ausbeuten in einem einschrittigen Aufreinigungsverfahren.

Anwendungen:
• FPLC-Reinigung von GST-getaggten Proteinen im mittleren bis großen Maßstab

Affinitätschromatographie wird oft als schnelles und problemloses Verfahren zur Reinigung rekombinanter Proteine verwendet. Im Rahmen eines häufig verwendeten Reinigungsverfahrens für rekombinante Proteine wird Glutathion-S-Transferase (GST) mit dem Zielprotein fusioniert und als Fusionsprotein exprimiert. Anschließend erfolgt die Reinigung mithilfe der starken und hoch spezifischen Wechselwirkungen von GST mit Glutathion, das auf den Beads des Trägers immobilisiert ist.

Pierce Glutathione Superflow Agarose ermöglicht die hochreine Aufreinigung von GST-Fusionspoteinen mit mittleren bis hohen Flussraten. Die zentrale Sulfhydrylgruppe des Glutathion wird dabei über einen 12-Atom-Spacerarm an Beads aus stark quervernetzter, 6%iger Superflow Agarose immobilisiert. Zur Demonstration der Leistungsfähigkeit dieser Methode wurde GST in 48 l überexprimiert und gereinigt. Die Biomasse (170 g) mit überexprimiertem GST wurde in 1,7 l Lysepuffer lysiert. Das Lysat wurde durch Zentrifugieren geklärt und in zwei Fraktionen aufgeteilt. Das Zielprotein wurde mit Pierce Glutathione Superflow Agarose sowie mit Harz eines anderen führenden Anbieters in äquivalenten 200 ml-Säulen mit gepackten Beads aufgereinigt. Die Gesamtausbeute, -rückgewinnung und -reinheit (> 95 %) waren für beide Harze nahezu identisch.

Weitere Produktdaten
• Leistungscharakterisierung von Pierce Glutathion Superflow Agarose

Ähnliche Produkte
Pierce™ Glutathion-Agarose