Aminreaktive Thermo Scientific™ Kits und Reagenzien für die isobare TMT-Atommassenmarkierung ermöglichen die quantitative Markierung von aus Zellen und Geweben extrahierten Proteinen für die Identifizierung und Analyse mittels Massenspektrometrie.
Das aminreaktive Thermo Scientific TMT™ Kit für die isobare Massenmarkierung enthält Markierungsreagenzien und zugehörige Reaktionsreagenzien, die eine Multiplexquantifizierung von Proteinen ermöglichen, die mithilfe von Tandem-Massenspektrometrie aus Zellen und Geweben extrahiert wurden.
Tandem Mass Tag™ 2-Plex (TMTduplex™) Reagents sind verschiedene isobare Verbindungen (d. h. gleiche Masser und Struktur, auch Isotopomere genannt), die für kovalente, irreversible Markierung primärer Amin(—NH2)-Gruppen NHS-aktiviert sind. Jedes isobare Reagenz enthält eine andere Anzahl schwerer Isotope im Massenreporterbereich, was zu einer einzigartigen Reportermasse während der Tandem-MS/MS für die Probenidentifizierung und relative Quantifizierung führt. Die Reagenzien markieren alle Peptide, die aus Zell- oder Gewebeproben zur Analyse von zwei Proben in einer einzigen MS-Analyse hergestellt wurden.
Merkmale des TMTduplex Kits zur isobaren Massenmarkierung:
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Leistungsstark—Die gleichzeitige MS-Analyse von zwei Proben erhöht den Durchsatz und ermöglicht die relative Quantifizierung zweier verschiedener Behandlungsbedingungen
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Konsistent—Identische Reagenzstruktur und -leistung unter TMTzero™, TMTduplex™,
TMTsixplex™ und
TMT10plex™ Reagenzien ermöglichen einen effizienten Übergang von der Methodenentwicklung zur Multiplex-Quantifizierung und ermöglichen so die Erforschung von Biomarkern über Plattformen und Datensätze hinweg
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Robust—Konsistente Chemie ermöglicht einen effizienten Übergang von der Methodenentwicklung zur Multiplex-Quantifizierung, ermöglicht Biomarkerforschung
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Effizient—Aminreaktive NHS-Ester-aktivierte Reagenzien gewährleisten eine effiziente Markierung aller Peptide unabhängig von Proteinsequenz oder proteolytischer Enzymspezifität
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Kompatibel—Optimiert für die Verwendung mit hochauflösenden Thermo Scientific MS/MS-Plattformen wie Q Exactive, Orbitrap Elite™ und Orbitrap Fusion™ Tribrid™ Geräten mit Datenanalyse, die vollständig von Proteome Discoverer™ 1.0 und höher
Anwendungen:• Erstellen von Proteinexpressionsprofilen für normale bzw. Krankheitszustände oder für Kontrollproben bzw. behandelte Proben
• Messung von zwei verschiedenen Proben gleichzeitig in einer einzigen Untersuchung
• Quantitative Analyse von Proteinen, für die keine Antikörper verfügbar sind
• Identifizierung und Quantifizierung von Membran- und posttranslational modifizierten Proteinen
• Identifizierung und Quantifizierung von Hunderten bis Tausenden von Proteinen in einer einzigen Untersuchung
Tandem Mass Tag (TMT) Reagenzien sind chemische Tags, die eine Identifizierung und Quantifizierung von Proteinen in verschiedenen Proben mittels Tandem-Massenspektrometrie ermöglichen. Die aminreaktiven, NHS-Ester-aktivierten Verbindungen binden sich kovalent an den Peptid-Amino-Terminus und die freien Amino-Termini von Lysinrückständen von Peptiden und Proteinen mit hoher Effizienz, wodurch alle Peptide in einer bestimmten Probe unabhängig von dem für den Verdau verwendeten Enzym markiert werden. Da TMT-Reagenzien eine identische Struktur und Masse haben (d. h. Isotopomere sind), werden markierte Peptide während der Trennung durch Flüssigkeitschromatographie (LC) gemeinsam eluiert und während der Analyse mit Tandem-Massenspektrometrie (MS/MS) gemeinsam isoliert, was zu weniger fehlenden Peptididentifikationen unter den Proben führt. Während der MS/MS-Analyse wird jeder isobare Tag ebenfalls fragmentiert, um eine eindeutige, zur Probenidentifizierung und Quantifizierung dienende Reporterionenmasse zu erzeugen. Die Proteinquantifizierung erfolgt durch den Vergleich der relativen Intensitäten der beiden Reporterionen in den MS/MS-Spektren.
Der isobare TMTduplex Reagenziensatz ermöglicht das Erstellen von Proteinprofilen für zwei Bedingungen mithilfe der Analyse durch Tandem-Massenspektrometrie. Der TMTzero-Tag ermöglicht das Testen und Optimieren von Probenvorbereitung, Markierung, Fraktionierung und MS-Fragmentierung für die Peptididentifizierung und den Reporternachweis ohne teurere isotopenmarkierte Verbindungen. Das TMTduplex Isotopenreagenzset kombiniert den TMTzero-Tag mit einem der
TMT6-Tags für die quantitative Proteinprofilierung von zwei Bedingungen auf MS-Ebene ähnlich wie beim SILAC.
TMT-Reagenzien werden als einzelne Sets oder in optimierten Kit-Formaten geliefert, die alle erforderlichen Reagenzien und Kontrollsubstanzen enthalten, um maximale Flexibilität, Komfort und Zuverlässigkeit zu gewährleisten. Reagenzien für Tandem-Massenmarkierung in Kombination mit branchenführenden Thermo Scientific Instrumenten und Softwareanwendungen bieten integrierte Gesamtlösungen für die quantitative Proteinexpressionsanalyse.
Ähnliche ProdukteTMTduplex™ Isotopen-Markierungsreagenz-Set, 5 x 0.8 mgTMTduplex™ Isobares Markierungsreagenz-Set, 5 x 0,8 mgTMTzero™ Markierungsreagenz, 5 x 0,8 mgNur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.