MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit
MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit
Applied Biosystems™

MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit

Das MagMAX™ FFPE DNA/RNA-Ultra-Kit wurde für die sequenzielle Isolierung von DNA und RNA aus derselben Formaldehyd- oder Paraformaldehyd-fixierten, paraffineingebetteten (FFPE)Weitere Informationen
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KatalognummerMenge
A318811 Kit
Katalognummer A31881
Preis (EUR)
764,00
Each
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Menge:
1 Kit
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Das MagMAX™ FFPE DNA/RNA-Ultra-Kit wurde für die sequenzielle Isolierung von DNA und RNA aus derselben Formaldehyd- oder Paraformaldehyd-fixierten, paraffineingebetteten (FFPE) Gewebeprobe entwickelt. Die DNA und RNA werden in separaten Eluaten gewonnen. Beide sind mit einer Vielzahl von Anwendungen kompatibel, darunter Echtzeit-PCR und Sequenzierung der nächsten Generation. Die Isolierung von RNA und DNA aus derselben FFPE-Probe macht dieses Kit zur idealen Methode für die Probenvorbereitung für ONCOMINE™ Comprehensive und ONCOMINE™ Focus Assays.

Zu den Merkmalen des MagMAX FFPE DNA/RNA-Ultra-Kits gehören:
• Flexibles Design, das sowohl die manuelle als auch die automatisierte Isolierung von RNA und DNA ermöglicht
• Minimaler Bedarf eines 5 µM-Abschnitts oder -Curls
• Verarbeitung von 40 µM-FFPE-Abschnitten oder -Curls; mehr als 40 µM große Abschnitte können mit einem alternativen Protokoll verarbeitet werden
• Kompatibel mit gezielten RNA- und DNA-Sequenzierungs-Panels
• Enthält Dynabeads™ MyOne™ Silan für eine konsistente Isolierung von RNA, microRNA sowie DNA
• Alternative Protokolle für die Isolierung nur von RNA oder DNA

Die Entschlüsselung der Informationen in FFPE-Proben ist für die Krebsforschung unerlässlich. Bei herkömmlichen Methoden zur Nukleinsäureisolierung müssen Sie entscheiden, welche Nukleinsäure aus einer bestimmten Probe gewonnen werden soll, wobei die andere Nukleinsäure verloren geht (und alle Informationen, die Sie durch ihre Analyse hätten gewinnen können). Alternativ werden DNA und RNA gleichzeitig gereinigt oder die Probe halbiert, sodass jede gereinigt werden kann.

Mehr Informationen bei geringerer Probenzugabe
Das MagMAX FFPE DNA/RNA-Ultra-Kit-Protokoll ist die Lösung für dieses Problem. Es isoliert zuerst die DNA aus der FFPE-Probe und dann die RNA aus dem DNA-freien Überstand. Die Nukleinsäuren werden als separate Eluate aufbereitet und sind daraufhin für die nachfolgende Analyse bereit. Dies ermöglicht eine umfassendere Analyse wertvoller Proben, einschließlich der Untersuchung wichtiger Biomarker wie Hotspot-Mutationen, CNVs, Genfusionen und Indels.

Vorteile der MagMAX Magnet-Bead-basierten Reinigung
Das magnetische Bead-basierte Aufreinigungsformat des Kits ermöglicht die einfache Skalierung der Anzahl der Proben, die entweder manuell mit einem Magnetständer oder mit einem Magnetpartikelprozessor wie dem KingFisher™ Duo Prime oder dem KingFisher™ Flex Prozessor verarbeitet werden.

Magnetbeads bieten im Vergleich zu anderen Technologien zur Isolierung von Nukleinsäuren viele Vorteile. Beads binden RNA und DNA effizienter als Glasfaserfilter, wodurch höhere und gleichmäßigere Erträge möglich sind. Da keine Filter und Vakuum-Sammelleitungen verwendet werden, besteht außerdem nicht die Gefahr, dass diese Elemente während des Extraktionsprozesses durch nicht digeriertes Gewebe verstopft werden. Dieses Verstopfungsproblem ist besonders bei faserigen FFPE-Gewebeproben problematisch, die während der Proteinase-K-Behandlung nicht vollständig aufgespaltet werden.

Optimierte Bead-Oberflächenchemie
Das Dynabeads MyOne Silan, das im MagMAX FFPE DNA/RNA-Ultra-Kit enthalten ist, verfügt über eine optimierte Silika-ähnliche Oberflächenchemie mit einer hohen spezifischen Oberfläche, die eine effiziente Kinetik und hohe Empfindlichkeit bei der Nukleinsäure-Erfassung ermöglicht. Diese Aspekte machen Dynabeads MyOne Silan ideal für die Rückgewinnung von RNA- und DNA-Targets, die in FFPE-Proben vorhanden sind. Nach der Aufnahme werden beide Nukleinsäuren separat in Volumina von 50 µl eluiert, um sie für Downstream-Prozesse vorzubereiten.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Zur Verwendung mit (Anwendung)Sequenzierung der nächsten Generation, RT-PCR (Endpunkt), Echtzeit-PCR, PCR, microRNA-Analyse
Hochdurchsatz-KompatibilitätGeeignet für hohe Durchsätze
ProduktlinieMagMAX
ProdukttypFFPE DNA/RNA Ultra-Kit
Menge1 Kit
ProbentypFFPE, Fixierte Proben
VersandbedingungFreigegeben für den Versand ohne Kühlung oder auf nassem Eis oder Trockeneis
ZielGesamt-RNA, miRNA, Gesamtnukleinsäuren, genomische DNA, mRNA, Transkriptom-RNA
FormatKit
Isolation TechnologyMagnetic Bead
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 1 x 385 µl Protease, Lagerung bei -5 bis -30 °C
• 1 x 10 ml Protease-Verdauungspuffer, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 38,5 ml Bindungslösung, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 1,95 ml Nukleinsäure-Bindungs-Beads, Lagerung bei 2 bis 8 °C
• 1 x 38,5 ml DNA-Waschpuffer, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 210 ml Waschlösung-2-Konzentrat, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 5 ml Elutionslösung, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 115 ml RNA-Waschpufferkonzentrat, Lagerung bei Raumtemperatur
• 1 x 1,92 ml DNase, Lagerung bei -5 bis -30 °C
• 1 x 960 µl DNase-Puffer, Lagerung bei -5 bis -30 °C

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I increase my chances of successful extraction of FFPE samples in terms of DNA quality and yield?

There are a number of factors that can impact the overall quality and yield of DNA isolated from FFPE tissues. Here are recommendations to address several key factors:

- Upstream tissue procurement and tissue specimen preparation - if possible, tissues should be fixed within one hour of surgical resection. The optimal fixation time is 12-24 hours using neutral-buffered formalin or paraformaldehyde. Fixed tissues should be thoroughly dehydrated prior to the embedding process.
- Block storage - storage of blocks without cut faces, when possible, prevents ongoing damage from exposure to atmospheric oxygen, water, and other environmental factors such as light and infestation (fungi, insects, etc.).
- Tissue type, size, and amount being used for DNA isolation - the recommended tissue thickness is 10-20 µm. The number of sections used is determined by the tissue type (which impacts cell density) and surface area (recommended size: 50-300 mm^2). Excess starting material can cause filter clogging, resulting in poor yield.
- Excessive amount of paraffin used for embedding tissues - when possible, excess paraffin should be trimmed away prior to starting the purification protocol. For xylene-based purification methods, two xylene treatments at room temperature should be sufficient for complete deparaffinization. If desired, a more rigorous 37-55 degrees C treatment can be performed for up to 30 minutes. After the xylene deparaffinization, it is crucial that the 100% ethanol is completely removed and the pellets are dry after the two 100% ethanol washes. The magnetic bead method employs novel chemistries to deal with the paraffin that limits input to 20 µm sections.

Read more about extraction of nucleic acids from FFPE samples here (http://www.thermofisher.com/us/en/home/references/Invitrogen-tech-support/rna-isolation/general-articles/extraction-of-nucleic-acids-from-ffpe-samples.html).

What can I use to extract DNA from FFPE (formalin fixed paraffin embedded) samples?

We offer 2 kits: RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE and MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit Read more about the differences between these kits here (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/dna-extraction/genomic-dna-extraction/dna-extractions-working-with-ffpe-samples.html).

Is there a limit to the size of curls that can be processed with the MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit (Cat. No. A31881)?

There is no specific upper limit to curl size for use with the MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra kit (Cat. No. A31881). If all of the tissue is able to be submerged in the 200 µL of buffer, then the large volume of protocol should work. Please keep in mind when processing sections that are thicker than 40 µm, additional digestion buffer, binding solution, and wash buffer, may need to be purchased separately (Cat. No. A32796).

Can I use a heat block for the AutoLys M tube incubation?

No. The AutoLys M tubes don't fit in a standard 1.5 mL or 2.0 mL heat block. We recommend incubating the tubes in the tube racks in an incubator or oven.

What kind of centrifuge do I need to spin down the AutoLys M Tubes (Cat. No. A38738)?

Any centrifuge with plate adapters will work. The AutoLys M Tube Racks fit nicely into those adapters.