Das Thermo Scientific Pierce Chromogenic Endotoxin Quant Kit ist ein hochsensitiver Endpunkt-Assay zur präzisen Messung und Detektion von Endotoxin (Lipopolysaccharid) in einer Protein-, Peptid-, Nukleinsäure- oder Antikörperprobe mit dem Limulus-Amöbozyten-Lysat-Assay. Das Kit ermöglicht den Nachweis in zwei linearen Empfindlichkeitsbereichen von 0,01 bis 0,1 EU/ml und 0,1 bis 1,0 EU/ml.

Merkmale und Vorteile des Pierce Chromogenic Endotoxin Quantifizierungskits:
• Hohe Sensitivität in einem breiten Bereich — Erkennung bereits bei 0,01 EU/ml bis 1 EU/ml
• Spezifisch — Keine Interferenz durch ß-Glucane und geeignet für ein breites Probenspektrum, einschließlich Protein, Vakzin, Plasmid, DNA und RNA
• Schnell — Assay-Durchführung in nur 20 Minuten
• Chromogener Endpunkt-Assay — Messung mit einem Standard-Spektralphotometer oder Plattenlesegerät bei 405 bis 410 nm

Das Pierce Chromogenic Endotoxin Quant Kit ist ein chromogener Endpunkt-Assay zum Nachweis von Endotoxin auf Grundlage der Limulus-Amöbozyten-Lysat-Methode, die Endotoxin durch die Interaktion des Endotoxins mit dem Proenzym Faktor C in den zirkulierenden Amöbozyten des Pfeilschwanzkrebses misst. Die proteolytische Aktivität dieses Proenzyms wird in Gegenwart von Lipopolysacchariden (Endotoxinen), die aus der äußeren Zellmembran gram-negativer Bakterien wie z. B. E. coli stammen, aktiviert. Die Endotoxinwerte werden durch Messung der Aktivität von Faktor C in Gegenwart eines synthetischen Peptidsubstrats bestimmt, das nach der Proteolyse p-Nitroanilin (pNA) freisetzt und eine gelbe Farbe erzeugt, die bei einer Extinktion von 405 nm gemessen werden kann.

Die Endotoxinwerte der Proben werden mit dem enthaltenen Endotoxin-Standard mit bekannter Konzentration bestimmt, der aus dem E. coli-Stamm O111 abgeleitetet wird: B4. Die Bestimmung der Endotoxinwerte ist wichtig, um die Effizienz von Methoden zur Endotoxinentfernung zu beurteilen und endotoxische Schocks, Entzündungen und/oder Sepsis in Gewebekulturzellen und Tieren zu verhindern, denen Endotoxin-kontaminierten Proteinen injiziert werden.

Anwendungen: Quantifizierung der Endotoxinwerte in Protein-, Peptid-, Antikörper- oder Nukleinsäureproben

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