Der Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 HCS-Assay ist eine hervorragende Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays und optimiert für High-Content-Bildgebungsanwendungen. Bei diesem Assay wird das geänderte Thymidin-Analogon EdU effizient in neu synthetisierte DNA integriert und mit einem hellen, lichtbeständigen Alexa Fluor™ Farbstoff in einer raschen, höchst spezifischen Click-Reaktion fluoreszenzmarkiert. Diese Fluoreszenzmarkierung proliferierender Zellen ist präzise und kompatibel mit Antikörper-Methoden aufgrund des schonenden Click-Protokolls.

• Einfach — Funktioniert beim ersten Mal, jedes Mal und in kürzerer Zeit
• Effizient — Ohne Denaturierungsschritte oder raue Behandlung
• Aussagekräftige Ergebnisse — Bessere Erhaltung der Zellmorphologie, Antigen-Struktur und DNA-Integrität
• Konsistent — Unabhängig von veränderlichen Antikörperchargen für den Nachweis

Die genauesten Methoden für den Proliferationsnachweis basieren auf dem Einbau und der Messung von Nukleosidanaloga in neu synthetisierter DNA, wobei Bromdesoxyuridin (BrdU) ein häufig verwendetes Analogon ist. BrdU-markierte DNA wird mit Anti-BrdU-Antikörpern nach der DNA-Denaturierung durch Eingriffe wie HCL, Hitze oder Enzyme zur Freilegung der BrdU-Moleküle quantifiziert. Dieser Schritt ist jedoch zeitaufwändig und dauerhaft kaum auszuführen. Eine raue Behandlung kann außerdem die Probenintegrität und -qualität beeinträchtigen, was eine Ko-Färbung mit anderen Antikörpern erschwert.

Überlegene Proliferationsmethodik
Der Click-iT™ EDU Alexa Fluor™ 647 HCS Assay stellt eine überlegene Alternative zu BrdU-Assays zur Messung der Zellproliferation dar. EdU (5-Ethinyl-2'-Desoxyuridin) ist ein Nukleosid-Analogon von Thymidin und wird während der aktiven DNA-Synthese in DNA eingebunden. Mit Click-iT™ EdU sind eine schonende Fixierung und Permeabilisierung mit Lösungsmitteln ausreichend, damit das niedermolekulare Click-iT™ EdU-Detektionsreagenz Zugang zur DNA erhält. Der Click-iT™ EdU HCS-Assay ist deshalb nicht nur einfach anzuwenden, sondern präziser und kompatibel mit der Zellzyklusanalyse und anderen intra- oder extrazellulären Analysen und liefert höchst aussagekräftige Ergebnisse.

Das Kit ist für High-Content-Bildgebungsanwendungen optimiert. Besuchen Sie den Bereich für die Click-iT™-Technologie auf unserer Website; dort finden Sie Kits für Fluoreszenzmikroskopie-, Mikrotiterplatten- oder Durchflusszytometrie-Plattformen.

Weitere Informationen zur Click-iT™-Technologie

Hinweise:
Click-iT™ Assays eignen sich für Zellen in Kulturen und in vivo nach der EdU-Zugabe über Zuführungs- oder Injektionsmethoden.
Click-iT™-Assays können mit BrdU für Doppelimpulsexperimente unter Anwendung von Anti-BrdU-Antikörper (MoBu-1 geklont) verwendet werden, ohne dass Kreuzreaktionen mit EdU auftreten.
Die Click-iT™ Technologie ist kompatibel mit immunhistochemischen, immunzytochemischen und Fluoreszenz-Farbstoffen, die fixierungstolerant oder für die Markierung fixierter Zellen vorgesehen sind.