La biocytine Thermo Scientific EZ-Link est une variante simple de la biotine qui contient une amine primaire dans sa chaîne d’acide valérique, qui fournit la base essentielle pour la construction de certains réactifs de biotinylation à chaîne longue et trifonctionnelle.

Caractéristiques de la biocytine EZ-Link :

• Biotinylation : marquez les molécules et les surfaces pour les dosages ou les méthodes de purification par affinité impliquant des sondes et des résines d’avidine ou de streptavidine
• Activé par l’amine : l’amine primaire peut être réticulée aux protéines et aux surfaces de matériaux à l’aide d’EDC et d’autres agents de réticulation
• Dérivé de la lysine : fonctionne comme un acide aminé marqué à la biotine ; potentiellement utile comme réactif de contrôle ou d’extinction dans les méthodes de dosage de la biotine
• Longueur moyenne : le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 20,1 angströms, ce qui représente une extension de 7 atomes de l’acide valérique de la biotine native

La biocytine est la ε-N-[d-biotinylé]-L-lysine, un composé formé par la conjugaison de l’epsilon amine de la lysine à la chaîne latérale d’acide valérique de la biotine. Il contient des groupes carboxyles et amino terminaux qui fournissent des poignées fonctionnelles pour la dérivatisation ou la conjugaison aux protéines, aux surfaces et à d’autres molécules. Les chimies de carbodiimide (EDC) et de réticulation NHS-ester sont le plus souvent utilisées pour les modifications covalentes impliquant des biocytines. Le composé est également utile comme contrôle des acides aminés ou comme étalon de biotine dans les méthodes de dosage impliquant la liaison de la streptavidine.

Nous fabriquons les réactifs de biotine de manière à ce que leur intégrité, homogénéité et performance soient des plus élevées, en fonction des applications de recherche ciblées.

Les composés amino-biotine peuvent être conjugués à des groupes fonctionnels de protéines et d’autres molécules de diverses manières. La méthode la plus courante consiste à réticuler l’amine primaire terminale aux groupes carboxyles à l’aide de . Groupes carboxyles (-COOH) se trouvent dans les résidus d’aspartate ou de glutamate et dans le terminus carboxy des polypeptides. Lorsqu’ils sont activés avec EDC (réf. n°22980), les carboxyles réagissent avec les groupes amino (—NH2) pour former des liaisons amides.

La biocytine contient des groupes amino et carboxyle. Par conséquent, pour prévenir l’auto-conjugaison de la biocytine, les systèmes de réaction à médiation EDC avec ce composé sont généralement réalisés en deux étapes, avec l’aide du sulfo-NHS (réf. n°24510) : (1) Activez une molécule carboxylate à l’aide d’EDC et de sulfo-NHS, puis éliminez ou inactivez complètement le réactif EDC ; puis (2) Ajoutez de la biocytine pour permettre à son amine primaire de réagir avec les groupes carboxyles activés par l’ester sulfo-NHS. Voir Chimie NHS-ester. Par la suite, le reste du groupe carboxyle de la biocytine pourrait être conjugué à une autre molécule. Par exemple, la biocytine est le matériau de départ pour la synthèse du sulfo-SBED (réf. n°33033), un réactif trifonctionnel.