HisPur™ Cobalt Purification Kit, 0.2 mL

Le kit de purification HisPur Cobalt Thermo Scientific contient des colonnes de centrifugation HisPur de 0,2 ml, des tampons et des tubes de prélèvement pour la purification de protéines marquées à la polyhistidine. La résine de cobalt HisPur dans ces colonnes est une résine d’agarose chélatrice tétradentate chargée de cobalt divalent (Co²⁺) pour obtenir des protéines marquées His à haut niveau de pureté sans contamination métallique.

Caractéristiques de la résine de cobalt HisPur :

• Haute pureté— Permet d’obtenir plus de 10 milligrammes de protéines pures marquées à l’histidine par millilitre de résine, sans optimisation des conditions de lavage de l’imidazole
• Spécificité— Le noyau de coordination cobalt-chélate se lie à un nombre inférieur de contaminants protéiques de l’hôte, ce qui donne un niveau de fond inférieur aux résines de nickel
• Faible lixiviation métallique— Aucune contamination métallique des protéines marquées à l’histidine dans l’échantillon élué
• Polyvalence— Purification des protéines dans des conditions natives ou dénaturantes ; compatible avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce et une variété d’additifs pour tampons
• Rentabilité— Résine réutilisable plusieurs fois ou jetée après une seule utilisation
• Flexibilité— Résine disponible en vrac, kits, colonnes prédistribuées, cartouches de chromatographie et plaques filtrantes à 96 puits

Par rapport aux résines Ni-IDA et aux résines de chélate Ni²⁺ tétradentaté, la résine HisPur se lie aux protéines marquées à l’histidine avec une spécificité plus élevée (moins de liaison hors cible) et les libère dans des conditions plus douces (concentrations plus faibles d’imidazole). Bien que les résines de chélate Ni(²⁺) atteignent des rendements protéiques élevés, elles se lient sans discrimination, ce qui donne une pureté suboptimale. Souvent, d’autres étapes de nettoyage sont nécessaires. En revanche, le cobalt maximise la pureté des protéines sans sacrifier le rendement des protéines. La résine de cobalt HisPur se lie à une quantité inférieure de protéines non spécifiques, présente moins de lixiviation métallique et produits des conditions d’élution moins strictes que les résines de nickel.

La résine de cobalt IMAC HisPur se lie spécifiquement à la protéine recombinante marquée à l’histidine pouvant être efficacement récupérée par élution légère d’imidazole. Il est possible de lier plus de 10 mg de protéines marquées à l’histidine par millilitre de résine à l’aide d’une protéine de fusion de 28 kDa exprimée et purifiée à partir d’un lysat E. coli.

Différentes protéines marquées à l’histidine peuvent être récupérées dans une pureté similaire ou supérieure par rapport à celle obtenue à partir d’autres résines en IMAC de nickel ou de cobalt disponibles à partir de colonnes de centrifugation ou d’écoulement par gravité. Les performances de purification de la résine de cobalt HisPur ont été comparées à celles des résines IMAC d’autres fournisseurs en utilisant plusieurs protéines marquées par His de tailles et de niveaux d’expression différents. Les résultats démontrent que la résine de cobalt HisPur atteint une pureté protéique maximale sans sacrifier le rendement protéique.

Formats disponibles :
• Pâtes de résine—Agarose en microbilles réticulée à 6 % ; flacons de 10 , 100 et 500 ml
• Colonnes de centrifugation—0,2 ml (microcentrifugeuse), colonnes de 1 et 3 ml
• Kits de purification—kits complets dans les trois tailles de colonne
• Cartouches de chromatographie—en savoir plus et consulter les données sur la cartouche de chromatographie HisPur
• Plaques de centrifugation à 96 puits

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