Les ensembles de réactifs de marquage de masse isobares réactifs à l’amine Thermo Scientific TMT10plex™ permettent l’identification multiplexée des protéines et l’analyse quantitative par spectrométrie de masse en tandem (MS).

Cet ensemble de réactifs de marquage de masse en tandem (Tandem Mass Tag™ [TMT™]) 10-plex contient dix composés isobares différents ayant la même masse et la même structure chimique (c’est-à-dire isotopomérique) composés d’un groupe ester NHS réactif à l’amine, d’un bras espaceur et d’un rapporteur de masse. L’ensemble de réactifs permet de marquer en parallèle jusqu’à dix échantillons de peptides différents préparés à partir de cellules ou de tissus, puis de les combiner pour analyse. Pour chaque échantillon, une masse rapporteur unique (c.-à-d. TMT10 126-131Da) dans la région à faible masse du spectre MS/MS à haute résolution est utilisée pour mesurer les niveaux d’expression protéique relatifs lors de la fragmentation des peptides et de la spectrométrie de masse en tandem.

Caractéristiques de cet ensemble de réactifs de marquage isobare TMT10plex :

• Puissant : l’analyse MS simultanée de plusieurs échantillons augmente le débit d’échantillons et permet l’analyse quantitative relative de jusqu’à dix échantillons différents dérivés de cellules, de tissus ou de liquides biologiques
• Cohérent : la structure et les performances des réactifs identiques parmi les réactifs TMTzero™, TMTduplex™, TMTsixplex™ et TMT10plex™ permettent une transition efficace du développement de méthodes à l’analyse quantitative multiplexée, permettant la recherche de biomarqueurs sur les plateformes et les ensembles de données
• Robuste : une capacité de multiplexage accrue entraîne moins de valeurs quantitatives manquantes parmi les échantillons et une plus grande confiance entre les réplicats
• Efficace : les réactifs activés par l’ester NHS réactifs aux amines garantissent un marquage efficace de tous les peptides, quelle que soit la séquence protéique ou la spécificité de l’enzyme protéolytique
• Compatible : optimisé pour une utilisation avec les plateformes Thermo Scientific MS/MS haute résolution, telles que les instruments Q Exactive, Orbitrap Elite™ et Orbitrap Fusion™ Tribrid™ avec analyse de données entièrement prise en charge par Proteome Discoverer ™1.4

Applications :
• Identification et quantification des protéines à partir de plusieurs échantillons de cellules, de tissus ou de liquides biologiques
• Profilage d’expression des protéines des états normaux par rapport aux états pathologiques ou témoins par rapport aux états traités
• Multiplexez jusqu’à dix échantillons différents simultanément dans une seule expérience
• Analyse quantitative des protéines pour lesquelles aucun anticorps n’est disponible
• Identification et quantification des protéines membranaires et modifiées par post-translation
• Identification et quantification de centaines à des milliers de protéines en une seule expérience

Les réactifs Tandem Mass Tag (TMT) sont spécialement conçus pour permettre l’identification et la quantification des protéines dans différents échantillons à l’aide de la spectrométrie de masse en tandem. Les réactifs de marquage TMT 10-plex partagent une structure identique avec les réactifs TMTzero, TMTduplex, and TMTsixplex, mais contiennent différents nombres et combinaisons d’isotopes 13C et 15N dans le rapporteur de masse. Les différents isotopes entraînent un ensemble de 10 plex de marqueurs qui présentent des différences de masse dans le rapporteur qui peuvent être détectées à l’aide d’instruments MS Orbitrap haute résolution.

Les avantages des réactifs de marquage TMT10plex incluent une analyse quantitative multiplexée relative accrue, un débit d’échantillons accru et moins de valeurs quantitatives manquantes parmi les échantillons. Les réactifs de marquage TMT10plex sont parfaits pour l’analyse de plusieurs échantillons de protéines à partir d’expériences sur la réponse aux doses d’inhibiteurs, d’expériences sur le temps de traitement ou de réplicats biologiques.

Les réactifs TMT sont fournis sous forme d’ensembles autonomes ou dans des formats de kits optimisés contenant tous les réactifs et contrôles nécessaires pour plus de commodité et une meilleure fiabilité