Les colorants ANEP sont des molécules qui deviennent fluorescentes sous l’influence des variations de potentiel électrique dans leur environnement. Ce sont des sondes à réponse rapide qui fonctionnent au moyen d’un changement dans leur structure électronique et, par conséquent, leurs propriétés de fluorescence, en réponse à un changement qui survient dans le champ électrique environnant. Leur réponse optique est suffisamment rapide pour détecter les changements de potentiel transitoires (en millisecondes) dans les cellules excitables, y compris les neurones uniques, les cellules cardiaques et les cerveaux intacts. Toutefois, l’amplitude de leur changement de fluorescence dépendant du potentiel est souvent faible ; les sondes à réponse rapide affichent généralement un changement de fluorescence entre 2–10 % par tranche de 100 mV. De plus, ces colorants affichent un changement de leurs spectres d’excitation dépendant du potentiel, permettant ainsi la quantification du potentiel membranaire à l’aide de mesures du rapport d’excitation.

Pour en savoir plus sur les indicateurs d’ions, notamment les indicateurs de calcium, de potassium, de pH et potentiel de membrane ›

. Spécifications du colorant ANEP sensible au potentiel :
• Les maxima Ex/Em liés aux membranes phospholipides modèles sont d’environ 465/635 nm (mais les propriétés spectrales sont fortement dépendantes de l’environnement)
• Non fluorescente jusqu’à ce qu’elle soit liée aux membranes
• Molécule cationique ; soluble dans l’eau (le di-2-ANEPEQ est un colorant ANEP hydrosoluble)
• Le colorant est généralement introduit dans les cellules par micro-injection
• Sonde à réponse rapide, adaptée à la détection des changements de potentiel membranaire en sous-millisecondes

Applications pour sondes potentiométriques
La membrane plasmique d’une cellule présente généralement un potentiel transmembranaire d’environ –70 mV (négatif à l’intérieur) en raison des gradients de concentration en K+, Na+ Cl– qui sont maintenus par des procédés de transport actifs. Les sondes potentiométriques offrent une méthode indirecte pour détecter la translocation de ces ions.

Les augmentations et diminutions du potentiel de la membrane—(appelées respectivement hyperpolarisation et dépolarisation membranaires)—jouent un rôle central dans de nombreux processus physiologiques, notamment la propagation des impulsions nerveuses, la contraction musculaire, la signalisation cellulaire et la synchronisation du canal ionique. Les sondes potentiométriques sont des outils importants pour l’étude de ces procédés.

Pour en savoir plus sur les colorants ANEP
Nous proposons des colorants ANEP sous différentes formes. Consultez Sondes à réponse rapide—Section 22.2 du manuel Molecular Probes™ pour plus d’informations sur ces sondes.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.