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了解您的样品纯度和浓度

对于从事DNA、RNA或蛋白质研究的科学家而言,样品质量往往是决定实验成败的关键。

Thermo Scientific™ NanoDrop™ One 紫外可见光分光光度计与 Invitrogen™ Qubit™ 3 荧光计配合使用时,能够获取所检测DNA、RNA或蛋白质样品的浓度和质量的最全面信息。尽早了解您的样品精确浓度和纯度有助于避免下游中代价高昂的故障排除和返工。

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专题视频:
定量分析——比较Qubit荧光计和Nanodrop One UV/Vis的吸光度

配合使用最佳—— Nanodrop One UV/Vis分光光度计和 Qubit 3 荧光计配合使用能够准确、简捷且快速地定量分析生物分子。

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我需要哪种仪器?

对于涉及核酸的工作流程,测定样品浓度(数量)和纯度(质量)常常是一个必要步骤。最终,您预先获知的样品信息越多,之后实验失败的潜在风险就越低。

NanoDrop One分光光度计和 Qubit 3荧光计都能准确测量DNA、RNA和蛋白质样品,两者各有其独特的优势。

被30,000 多份文献引用,NanoDrop 微量紫外-可见光分光光度计免除了大样本量的需要,从根本上改变了科学家们评估核酸和蛋白样品的方式。

新一代NanoDrop One微量分光光度计采用Thermo Scientific™ Acclaro™ 样品情报技术,能识别污染物,提供经过校正的浓度值,并在您将样品用于后续应用之前帮助您评估其质量。

Qubit 3 荧光计是一款先进的台式设备,能利用高度灵敏的 Invitrogen™ Qubit™定量检测试剂准确测量DNA、RNA和蛋白质。

Qubit 3 荧光计配有高度优化的先进算法和无缝用户界面,采用只在结合目的靶标时才产生信号的荧光染料,因此能最大限度地减少污染物(包括降解的DNA或RNA)对试验结果的影响。

进一步了解 Qubit 3 荧光计的检测方法

仪器对比

  NanoDrop One 分光光度计 Qubit 3 荧光计
概述

快速简便——可直接测量纯化样品,无需稀释

灵敏特异——准确测量核酸浓度,包括 dsDNA、ssDNA、总RNA或microRNA,即使存在污染物亦不受影响

技术 紫外吸收 荧光
工作流程 将样品吸移至基座;测量 将样品与试剂混合,孵育 2-5 分钟,读取结果。
应用 对DNA、RNA及蛋白质的数量和质量(纯度)进行常规评估

检测浓度极低或难以处理的样品,尤其是在要求更高的灵敏度或可能存在核酸污染物(例如 RNA中的DNA;存在dNTP)时

dsDNA 定量范围 (ng/μL) 0.2*– 27,500 0.01–1,000
样品质量评估(纯度)

Acclaro样品情报技术可识别是否存在污染物,如蛋白或胍类;提供经过校正的分析物浓度值

被蛋白污染的dsDNA样品。从原始结果(蓝色)中减去蛋白的吸光度贡献值(橙色),从而获得经过校正的dsDNA浓度(绿色)。

独特的荧光染料能区分不同的样品类型,包括核酸(例如DNA与RNA),无需任何样品预处理。

 Qubit dsDNA HS试剂盒对dsDNA有高度选择性,即使存在等量的RNA亦不受影响。

NanoDrop One的 *dsDNA定量范围是0.2 ng/μL(带比色皿)和 2.0 ng/μL(不带比色皿)。

如果样品纯度为100%且只包含单一核酸类型(例如 dsDNA),则在 NanoDrop One 分光光度计和 Qubit 3 荧光计上测得的样品结果在仪器动态范围内预计完全相同。但是,几乎没有样品能达到 100% 的纯度。

对于大多数从事核酸研究的实验室而言,同时拥有 NanoDrop One 分光光度计的速度和灵活性与 Qubit 3 荧光计的特异性和灵敏度是极其必要的。而且,这两款精心设计的仪器可以对目标生物分子进行精确定量和智能化质量评估,避免下游实验失败,从而为您的实验室节省大量时间和金钱。

定量核酸:下游应用指南

应用 NanoDrop One 分光光度计 Qubit 3 荧光计
常规 PCR 这些年以来,常规PCR应用发展迅猛。使用UV完全能够准确定量模板。 适用于常规样品,如果样品中出现大量在 260 nm (A260)处吸收的污染物(dNTP、寡核苷酸、RNA 等),则是首选方法。
定量 PCR UV法可以帮助研究者确定是否存在可能影响聚合酶反应的污染物(例如苯酚)。 可靠的 qPCR 结果需要高度精确的模板浓度。Qubit 检测的特异性和灵敏度非常符合这项工作的要求。
测序 UV法完全能够准确定量模板,除非样品中容易出现大量光谱吸收峰在 260 nm (A260) 处吸收的污染物(例如DNA样品中的RNA)。 如果样品中容易出现光谱吸收峰在260 nm (A260) 处吸收的污染物,Qubit检测的高度特异性将极为有利。
二代测序 在文库构建过程中用于样品评价的 UV 法可以帮助研究者确定是否存在可能影响工作流程不同阶段的污染物。 可靠的NGS结果需要高度精确的模板浓度。Qubit 检测的特异性和灵敏度非常符合这项工作的要求。
RT-qPCR 标准RNA提取不容易受到DNA污染,因此UV测量可用于使进入反应的RNA量标准化。 Qubit 检测的特异性和灵敏度很适合常规样品,如果样品中容易出现DNA污染物或降解的 RNA(dNTP 和 NTP),则是更为可取的方法。
染料标记微阵列探针的质控 可同时测量染料量和探针量。 NA 不建议将Qubit assay用于染料标记微阵列探针的质控,但其可用于准确测量微阵列探针的浓度。
基因分型 / 突变检测   A260 测量可能因存在混合污染物而高估浓度。 样品中往往含有在 260 nm (A260) 处吸收的污染物,这使得Qubit检测的特异性更为可取。

定量蛋白

NanoDrop One 分光光度计 Qubit 3 荧光计

预编程应用的选择

  • 采用蛋白编辑器直接定量 A280
  • 缺乏色氨酸和酪氨酸残基的蛋白质或多肽的 A205 肽键吸光度
  • 蛋白比色检测:Bradford、BCA、Lowry 和 Thermo Scientific™ Pierce™ 660 nm 检测
     

三个样品的总蛋白浓度在BCA检测标准曲线上显示为红色方块(顶部面板);采用蛋白 A280 应用测量四种不同的纯化蛋白样品(底部面板)。

Qubit 检测具有极低的蛋白间变异率,能耐受大多数污染物,包括盐类、还原剂(DTT、β-巯基乙醇)、DNA和氨基酸,但不包括去污剂。

Qubit 蛋白检测的蛋白间变异率极低。测定了以下蛋白的溶液:牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白、鸡卵清溶菌酶、牛乳 β-酪蛋白、马肌红蛋白、牛乳 α-酪蛋白、猪胃蛋白酶、小鼠免疫球蛋白(IgG)和小牛胸腺组蛋白。


紫外可见光及可见光分光光度计

我们的全系列紫外-可见 (UV-Vis) 分光光度计能够满足您的分析需求。我们屡获殊荣的设计和用户友好的软件可帮助您定量和评估纯度等。

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荧光计和荧光

荧光计可根据激发波长(Ex)和发射波长(Em)测量生物分子和自然荧光分子所附染料的荧光信号强度,从而定量、检测和监测分析物及其反应。

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NanoDrop One 分光光度计和 Qubit 3 荧光计
对于从事 DNA、RNA或蛋白质研究的科学家而言,样品质量往往是决定实验成败的关键。将 NanoDrop One 紫外可见光分光光度计与 Qubit 3 荧光计配合使用,您的实验室就能获得关于 DNA、RNA 或蛋白样品浓度和质量的最全面信息。

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