Countess 3 FL Automated Cell Counter

Outre le comptage des cellules, les capacités de fluorescence de l’instrument Countess 3 FL sont souvent utilisées pour évaluer la viabilité cellulaire, l’apoptose, l’efficacité de la transfection et l’expression de protéines fluorescentes. Mais les applications s’étendent à tous les paramètres cellulaires qui sont autofluorescents ou qui peuvent être marqués à l’aide de colorants fluorescents. Vous trouverez des données illustrant le contrôle de la qualité de la culture cellulaire, l’analyse des cellules CAR-T, l’efficacité de l’édition CRISPR-Cas9 et d’autres applications de fluorescence dans la section Données d’échantillons.

Viabilité cellulaire. L’évaluation de la viabilité cellulaire est une étape clé de la culture cellulaire quotidienne et est nécessaire pour un traitement en aval exact et efficace. Les options de fluorescence Countess 3 FL offrent un contrôle de viabilité sensible et spécifique qui peut être effectué rapidement et facilement avant l’analyse des échantillons en aval.

Bien que le bleu trypan soit largement utilisé pour l’évaluation de la viabilité dans le comptage des cellules à champ lumineux, il peut modifier la morphologie cellulaire dans certains cas. Par exemple, lorsque les PBMC de souris mortes sont colorés avec du bleu trypan, ils peuvent se développer et s’enfoncer dans un plan focal différent de celui des cellules vivantes, ce qui complique la détection et le comptage exacts. Comme alternative à la fluorescence, la coloration de viabilité ReadyCount Verte/Rouge Invitrogen contient de l’acridine orange et de l’iodure de propidium (AO/PI) dans une combinaison optimisée. La coloration fluorescente offre une grande sensibilité et une plus grande spécificité de l’état vivant/mort dans une population cellulaire mixte sans altérer la morphologie de la cellule.

Grâce aux capacités de fluorescence du Countess 3 FL Automated Cell Counter, vous pouvez facilement visualiser les protéines fluorescentes et effectuer des tests d’apoptose ou de prolifération dans votre salle de culture cellulaire. 

L’instrument Countess 3 FL dispose de deux canaux de fluorescence en option qui détecteront les couleurs fluorescentes déterminées par l’insertion de cubes lumineux individuels. Avec 14 cubes lumineux interchangeables à choisir, l’instrument Countess 3 FL ne se limite pas à la détection de cellules exprimant la GFP et la RFP.

Les cubes de lumière LED Invitrogen EVOS qui alimentent ces applications de fluorescence sur le Countess 3 FL fournissent plus de 50 000 heures d'éclairage brillant (mais réglable) qui reste constant avec une dégradation minimale dans le temps. Les cubes lumineux à LED EVOS économiques, écologiques et spectralement optimisés sont conçus pour un contrôle précis, une maintenance minimale et une fiabilité exceptionnelle.

Chaque cube contient un voyant lumineux, une optique d’éclairage et des filtres. Les cubes lumineux sont interchangeables par l’utilisateur et automatiquement détectés par le système Countess 3 FL pour une facilité de branchement.

Conseil : Les cubes lumineux ne sont pas fournis avec le compteur de cellules Countess 3 FL ce qui permet d’effectuer une personnalisation en fonction des colorants et des protéines fluorescentes utilisés. 

Choisissez des cubes lumineux dont le spectre correspond aux colorants et aux applications de comptage que vous souhaitez utiliser. Les cubes lumineux sont faciles à échanger et peuvent être achetés à tout moment pour répondre aux nouvelles exigences d’application. Une large gamme de colorants est prise en charge.

Bien que de nombreux chercheurs choisissent la GFP et la RFP pour la détection des protéines fluorescentes, il existe 14 choix de cubes lumineux EVOS à voyants lumineux. Le DAPI est un colorant nucléaire traditionnellement utilisé. Le tableau présente les colorants courants détectés par ces sept cubes lumineux courants.

Supposons que vous soyez intéressé à mesurer à la fois l’apoptose et la viabilité des cellules d’une population. Vous pouvez utiliser un indicateur d'apoptose qui mesure l'activation de la caspase, tel que le CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent avec le cube lumineux EVOS GFP 2,0. En outre, utilisez un colorant de viabilité tel que SYTOX Red Dead Cell Stain avec le cube lumineux EVOS Cy5 2,0 pour mesurer les cellules mortes qui ont progressé après l'apoptose. Cette combinaison de colorations, ainsi que les deux cubes lumineux EVOS, offre une méthode multiplex simple et rapide pour obtenir des données sur l’apoptose et la viabilité.

La coloration par fluorescence peut fournir de riches données sur les cellules,en particulier dans les échantillons hétérogènes, mais les colorants de qualité commerciale peuvent présenter des difficultés à être mélangés,titrés ou appliqués pour des performances optimales. Les réactifs Invitrogen ReadyCount sont des colorants fluorescents stables sur paillasse qui sont préoptimisés pour une utilisation avec le Countess 3 FL Automated Cell Counter. 

Les réactifs ReadyCount peuvent être utilisés pour colorer des cellules nucléées spécifiques au sein de populations mixtes, réduisant ainsi la complexité et améliorant la reproductibilité comptage-à-comptage et échantillon-à-échantillon lorsqu’ils sont appariés au cube lumineux EVOS approprié. Mélangez simplement 10 µL d'échantillon cellulaire avec 10 µL de colorant, pipetez la solution dans une chambre Countess ou une lame réutilisable, et insérez la lame dans l'instrument.