Pierce™ Antibody Clean-up Kit

Das Thermo Scientific Pierce Antikörper-Aufreinigungskit dient zur Entfernung von BSA, Gelatine und anderen Stabilisatorproteinen aus Antikörper-Stammlösungen vor der aminbasierten chemischen Markierung und Konjugation.

Merkmale des Antikörper-Aufreinigungskits:

• Schnell – entfernt Trägerprotein aus Antikörperlösungen in der Hälfte der Zeit, die für die Reinigung von Antikörpern durch Protein A- oder G-Reinigungsverfahren erforderlich ist
• Sanft – es besteht keine Notwendigkeit, die Effekte von harten Elutionspuffern zu neutralisieren oder zu entsalzen
• Vollständig – die mitgelieferten Entsalzungssäulen ermöglichen einen einfachen Pufferaustausch in den erforderlichen Aufreinigungspuffer oder einen schnellen Austausch in einen Endpuffer Ihrer Wahl
• Kostengünstig – ausreichend Reagenzien für die Durchführung von 10 Antikörper-Aufreinigungsreaktionen

Dies ist ein vollständiges und anwenderfreundliches Kit zur Entfernung von BSA- und Gelatinestabilisierproteinen (bis zu 1 %) aus IgG-Proben. Das Protokoll verwendet Thermo Scientific Melon Gel, um diese häufig verwendeten Speicherproteine zu binden, sodass der Antikörper in gereinigter Form durchfließen kann. Der Antikörper wird in einem amin- und carboxylfreien Puffer wiedergewonnen, der für Folgeanwendungen wie Biotinylierung, Fluoreszenzmarkierung, Vernetzung, Immobilisierung und enzymatische Fragmentierung (z. B. Fab-Präparation) geeignet ist.

Rinderserumalbumin (BSA) und Gelatine werden häufig zu gereinigten Antikörperlösungen als Stabilisatoren für die Langzeitlagerung hinzugefügt. Die Aufnahme von 0,2 bis 1 % (2 bis 10 mg/ml) BSA oder Gelatine trägt zur Stabilisierung verdünnter Antikörperlösungen bei. Im Allgemeinen stören diese zugesetzten Proteine die Immundetektionsmethoden nicht; ihre Anwesenheit in der Lösung beeinträchtigt jedoch die aminreaktiven Konjugations-Reaktionen, welche die Grundlage für die meisten Biotinylierungen, die Fluoreszenzfarbstoffmarkierung, die Antikörperfragmentierung und kovalente Immobilisierungsmethoden sind. Für solche Methoden muss der Antikörper aus den stabilisierenden Proteinen isoliert werden, und das Antikörper-Aufreinigungs-Kit erreicht dies auf effiziente Weise.

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