T-PER™ Extraktions-Reagenz für Gewebeprotein

Thermo Scientific T-PER Tissue Protein Extraction Reagent ermöglicht die schonende Gesamtproteinextraktion aus Gewebeproben.

Merkmale von T-PER Tissue Protein Extraction Reagent:

• Einfache Anwendung – die Gewebeprobe wird einfach im Verhältnis 1:20 (w/v), Gewebe zu T-PER Reagenz, homogenisiert und dann zentrifugiert, um Zell- oder Gewebereste zu pelletieren
• Schonend und praktisch – für eine schnelle und einfache Entfernung ist das Detergens dialysierbar; gestattet den Gebrauch mit zusätzlichen Komponenten (z. B. Proteaseinhibitoren, Salzen, Reduktionsmitteln, Chelatbildnern usw.)
• Flexibel –das Lysat kann für Reporter-Assays, Proteinkinase-Assays, Immunassays und/oder zur Proteinaufreinigung verwendet werden
• Kompatibel – das Lysat ist mit gängigen Proteinassays kompatibel, beispielsweise dem Thermo Scientific Pierce Coomassie Plus (Bradford) Proteinassay

Produktdetails

Dieses Zelllyse-Reagenz für Gewebe verwendet ein firmeneigenes Detergens in 25 mM Bicin und 150 mM Natriumchlorid (pH 7,6), um die Effizienz der Proteinsolubilisierung von Gewebeproben aus Säugtieren mittels Homogenisierung zu optimieren. Dank der einfachen Zusammensetzung ist das Produkt mit vielen Zusätzen wie Protease-Inhibitoren, Salzen, Reduktionsmitteln und Chelatbildnern kompatibel. Dies gewährleistet den vielseitigen Einsatz mit unterschiedlichen Probentypen und Lyse-Anwendungen. Mit T-PER Reagenz hergestellte Zelllysate sind direkt kompatibel mit Reporter-Assays (z. B. Luziferase, Beta-Galactosidase, Chloramphenicol-Acetyltransferase), Proteinkinase-Assays (z. B. PKA, PKC, Tyrosinkinasen), Immunassays (z. B. Western Blot, ELISA, RIA) und/oder Proteinaufreinigungsverfahren.

Die homogene und effiziente Gewebeproteinextraktion aus verschiedenen Proben ist aufgrund der unterschiedlichen Gewebezusammensetzung und Extraktionsmethoden eine Herausforderung. Bei faser- und kollagenhaltigem Gewebe, zum Beispiel von Herz und Nieren, ist die Proteinextraktion durch Gefrier-/Tau-Technik oder durch das Zermahlen im Mörser ohne den Einsatz von Reinigungsmitteln ineffizient. Weiches Gewebe hingegen, zum Beispiel aus Milz- und Leberproben, erfordert für optimale Ergebnisse ein schonendes Extraktionsprotokoll. T-PER Reagent wurde für den Einsatz mit allen Gewebesorten entwickelt, unabhängig vom mechanischen Extraktionsverfahren. Das milde Detergens verbessert die Solubilisierung von Proteinen, ohne deren Funktion zu beeinträchtigen. Der neutrale pH-Wert und die Salzkonzentration dieses Reagenz ermöglichen eine effizientere Extraktion aus Zellkompartimenten und liefert dadurch homogene Lysate.

T-PER Reagenz wurde für die Proteinausbeute aus frischem und gefrorenem Gewebe validiert. Protokolle mit gefrorenem Gewebe oder Gefrier-/Tau-Extraktion führen in der Regel zu einer höheren Ausbeute. Darüber hinaus extrahiert das T-PER-Reagenz nachweislich Zielproteine effizient aus verschiedenen Zellkompartimenten wie Plasmamembran (Na-K+-ATPase, Pan-Cadherin), Zytoplasma (HSP90, MAPK), Mitochondrien (COXIV) und Zellkern (HDAC1) als gewebespezifische Marker aus dem Gehirn (Synaptophysin) und dem Herzgewebe (Troponin T kardiale Isoform).

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