Bei Thermo Scientific Pierce DMEM für die Isolierung von Primärzellen handelt es sich um das klassische Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) – hoher Glukosekonzentration, das sich als ideal für die Isolierung von Primärzellen, einschließlich Kardiomyozyten, erwiesen hat. Das Thermo Scientific Pierce Isolierungskit für primäre Kardiomyozyten bietet Isolierungs- und Kultivierungsreagenzien für die optimale Ausbeute und Lebensfähigkeit von primären Kardiomyozyten aus neonatalen Maus- und Rattenherzen.

Merkmale von Thermo Scientific Pierce DMEM für die Isolierung von Primärzellen:

• Optimiert – Verfahren und Reagenzien für Lebensfähigkeit, Ausbeute, Reinheit und Anwenderfreundlichkeit optimiert
• Zeitersparnis – Isolierungsprotokoll erfordert weniger als 2 Stunden im Vergleich zu den bis zu 21 Stunden bei anderen Methoden
• Ausbeute – bietet eine 1,5- bis 4-fache Steigerung der Ausbeute im Vergleich zu selbst entwickelten Methoden und anderen kommerziell erhältlichen Kits
• Lebensfähigkeit – bietet eine höhere Lebensfähigkeit als selbst entwickelte Methoden und andere kommerziell erhältliche Kits
• Funktional – die in Kultur hergestellten Kardiomyozyten exprimieren die entsprechenden biochemischen Marker mit validierter Schlagaktivität

Beinhaltet:
• Das komplette Kit beinhaltet Kardiomyozyt-Isolierungsenzym 1, Kardiomyozyt-Isolierungsenzym 2, Hanks' ausgewogene Salzlösung (HBSS), DMEM für die primäre Zellisolierung und Kardiomyozyt-Wachstumssupplement

Anwendungen:
• Differenzierung von Kardiomyozyten
• Immunhistochemie (IHC)
• Funktionelle und biochemische Assays
• Biologisch relevantes System für die präklinische Arzneimittelforschung und Erstellung von prädiktiven Krankheitsmodellen

Das Isolierungskit für primäre Kardiomyozyten wurde entwickelt, um eine hohe Lebensfähigkeit und Reinheit der primären Kardiomyozyten mit validierten Reagenzien und einem optimierten Verfahren für den Enzymverdau und die Kultivierung zu erzielen. Das Kit enthält zwei gewebespezifische Dissoziationsenzyme, für die Primärzellkultur formulierte Medien und ein Supplement für das Wachstum von Kardiomyozyt-Zellkulturen, die die Isolierung, Anreicherung und das Wachstum von funktionellen Kardiomyozyten fördert. Das validierte Protokoll gewährleistet eine optimale Isolierung und reduziert die Verarbeitungszeit bei der Isolierung im Vergleich zu anderen Methoden erheblich. Die Zugabe des Kardiomyozyt-Wachstumssupplements zu Kulturzellen reichert diese weiter für Kardiomyozyten an. Kulturen wurden mit dem Inhalt des Kits bis zu 7 Tage aufrechterhalten.

Aktuelle Methoden zur Dissoziation von Herzzellen von Herzgewebe erfordern einen wiederholten (5 bis 8 Inkubationen) oder langwierigen (> 16 Stunden) Enzymverdau, was zu einer reduzierten Ausbeute und Lebensfähigkeit isolierter Zellen führt. Das Pierce Primary Cardiomyocyte Isolation Kit bietet vollständig optimierte Reagenzien und ein Protokoll, das einen Überverdau bei der Isolierung und Zucht von Kardiomyozyten verhindert. Der gesamte Prozess von der Behandlung von Primärgewebe bis hin zur Aussaat von Zellen in Kulturgefäßen kann innerhalb von 2 Stunden abgeschlossen werden.

Durch die Verwendung von optimierten, gewebespezifischen Dissoziationsenzymen isoliert dieses Kit Kardiomyozyten mit größerem Ertrag und größerer Zellviabilität als bei Zellen, die mit bestehenden Methoden isoliert wurden. Die isolierten primären Kardiomyozyten exprimieren Kardiomyozyten-Proteinmarker und weisen eine kontraktile Funktion auf (Schlagaktivität, siehe Video), wodurch ein Modellsystem für Studien zur Kontraktion, Ischämie, Hypoxie und Toxizität verschiedener Verbindungen entsteht.

   

Weitere Produktdaten
• Einstündiges Verfahren zur Isolierung von primären Kardiomyzyten aus neonatalen Maus- und Rattenherzen

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