5'			G	G	G	A	C	N10	↓		3'
3'			C	C	C	T	G	N14	↑		5'

Das Thermo Scientific FastDigest FaqI Restriktionsenzym erkennt die GGGAC(10/14)^-Stelle und schneidet am besten bei 37°C in 5 bis 15 Minuten mit dem FastDigest Universalpuffer. Isoschizomere: BsmFI, BslFI.

Thermo Scientific FastDigest FaqI gehört zu einer modernen Produktlinie schneller Restriktionsenzyme, die alle zu 100 % im FastDigest Universalpuffer und FastDigest Green Reaktionspuffer aktiv sind.

Der Universalpuffer ermöglicht einen schnellen Einzel-, Doppel- oder Mehrfachverdau von DNA innerhalb von 5 bis 15 Minuten ohne erforderlichen Pufferwechsel oder anschließende DNA-Reinigungsschritte. Unter Reaktionsbedingungen für FastDigest-Enzyme finden Sie eine Tabelle mit Angaben zu Enzymaktivität, Hitzeinaktivierung und Inkubationszeiten für diese und andere FastDigest-Restriktionsenzyme. DNA-modifizierende Enzyme wie das Klenow-Fragment, T4 DNA-Ligase, alkalische Phosphatasen und T4 DNA-Polymerase besitzen alle im FastDigest-Puffer eine uneingeschränkte Aktivität. Aus diesem Grund können Enzyme für nachfolgende Anwendungen direkt dem FastDigest-Reaktionsgemisch hinzugefügt werden.

Als zusätzliche Erleichterung enthält FastDigest Green Buffer ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen der verdauten Reaktionsprodukte auf ein Gel.

Kurze Inkubationszeiten und eine optimale Zusammensetzung des FastDigest-Universalpuffers verhindern das Auftreten von Star-Aktivitäts-Effekten.

Eigenschaften

• 100 % Aktivität aller FastDigest-Enzyme im Universalpuffer
• 100 % Pufferkompatibilität mit nachfolgenden Anwendungen
• vollständiger Verdau in 5 bis 15 Minuten
• direktes Auftragen auf Gele möglich
• keine Star-Aktivität
• 176 FastDigest-Enzyme erhältlich

Anwendungen

• molekulare Klonierung
• Kartierung von Restriktionsstellen
• Genotypisierung
• Southern Blot
• Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus (RFLP)
• SNP-Analyse

Hinweis: FastDigest FaqI benötigt für seine Aktivität nur Mg²⁺, wird aber von SAM angeregt. 0,05 mM SAM führt zu einer über 2-fachen Zunahme der FastDigest FaqI-Aktivität. Dennoch ist die vollständige Spaltung einiger Substrate mit FastDigest FaqI schwer zu erreichen. Für die Spaltung mit FastDigest FaqI werden mindestens zwei Kopien seiner Erkennungssequenz benötigt.

FastDigest Green Buffer bietet dieselbe hohe Leistung beim DNA-Verdau und im Downstream-Prozess wie der farblose FastDigest-Puffer. Für Anwendungen, die eine Produktanalyse durch Fluoreszenzanregung erfordern (z. B. Konzentrationsmessungen in UV-Licht), wird der farblose FastDigest-Puffer empfohlen.

Angaben zur Methylierungssensitivität finden Sie in den Produktspezifikationen.