Le kit Thermo Scientific Maxima H Minus de synthèse d’ADNc premier brin est un système complet permettant la synthèse très efficace d’ADNc premier brin. Ce kit utilise la transcriptase inverse (RT) Maxima H Minus, qui est une enzyme avancée obtenue par évolution in vitro de la RT M-MuLV. L’enzyme présente la thermostabilité la plus importante parmi les dérivés de la RT M-MuLV et est dénuée de l’activité RNAse H. Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus permet la synthèse d’ADNc d’une longueur allant jusqu’à 20 kb à des températures élevées (jusqu’à 65°C), supplantant les capacités d’autres systèmes à produire de l’ADNc pleine longueur. En raison de l’augmentation des taux de synthèse, la réaction peut être effectuée en 30 minutes.

Points clés

• Augmentation des températures de réaction : l’ADNc premier brin peut être synthétisé dans la plage de températures de 42 à 65°C
• Rendements élevés de synthèse d’ADNc premier brin pleine longueur avec des modèles d’ARN jusqu’à 20 kb
• Amorçage flexible : oligo(dT)₁₈, hexamère aléatoire ou amorces spécifiques aux gènes

Applications

• Synthèse d’ADNc premier brin pour la RT-PCR
• Construction de bibliothèques d’ADNc
• Génération de sondes d’hybridation
• Synthèse d’ARN antisens

Comprend

• Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus contient le mélange enzymatique Maxima H Minus, l’oligo(dT)₁₈ et des amorces hexamères aléatoires, un tampon 5X RT, un mélange dNTP et de l’eau sans nucléase.

Informations supplémentaires sur les composants de la réaction

• Le mélange enzymatique Maxima H Minus Enzyme Mix contient la transcriptase inverse Maxima H Minus et l’inhibiteur d’ARNase RiboLock. L’inhibiteur d’ARNase RiboLock protège efficacement les modèles d’ARN de la dégradation par les RNAses A, B et C à des températures jusqu’à 55°C.
• Les amorces oligo(dT)₁₈ et les amorces hexamères aléatoires sont fournies avec le kit. Les amorces hexamères aléatoires se lient de façon non spécifique et sont utilisées pour synthétiser l’ADNc à partir de tous les ARN d’une population d’ARN totaux. L’amorce oligo(dT)₁₈ se fixe de manière sélective par hybridation à l’extrémité 3 de l’ARN poly(A), synthétisant l’ADNc uniquement à partir des ARNm à queue poly(A). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent également être utilisées avec le kit pour amorcer la synthèse à partir d’une séquence donnée.
• Le mélange dNTP 10 mM est une solution aqueuse pré-mélangée de dATP, dTTP, dCTP et dGTP.
• De l’eau exempte de nucléase est fournie pour la préparation de la réaction et la dilution des échantillons d’ADN. L’absence d’endo-, d’exodésoxyribonucléases, de ribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.

Produits associés
Kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus, avec DNasedb
Kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus