La fluorescence du colorant pHrodo augmente considérablement à mesure que le pH baisse, du neutre vers l’acide, ce qui en fait un outil idéal pour étudier la phagocytose et sa régulation par des médicaments et/ou des facteurs environnementaux. À l’extérieur de la cellule, le colorant n’est pas fluorescent, ce qui élimine le besoin d’étapes de lavage et de colorants extincteurs. Une fois internalisé, le colorant est fortement fluorescent dans les environnements acides des endosomes et des lysosomes, permettant le développement rapide des dosages et la fiabilité des résultats lors de l’étude des voies phagocytiques et de leur régulation par des médicaments et/ou des facteurs environnementaux. Ainsi, les conjugués de colorants pHrodo peuvent être utilisés dans les lecteurs de plaques, l’imagerie par microscopie par fluorescence et les applications de cytométrie en flux.

Le conjugué pHrodo Red S. aureus BioParticles pour la phagocytose (n° de cat. A10010) offre des résultats de dosage rapides et précis. Les conjugués de colorants pHrodo Red ne sont pas fluorescents à l’extérieur de la cellule, mais sont fortement fluorescents en rouge dans les phagosomes. Le conjugué pHrodo Red E. coli BioParticles pour la phagocytose (n° de cat. P35361) détecte la phagocytose et l’endocytose, offre une réduction de la variabilité du signal et une meilleure synchronisation dans les expériences sensibles, et peut être utilisé dans les applications de multiplexage avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, verts et rouge profond, tels que GFP, Fuo-4, calcéine, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 green, Mitosox Green et Mitotracker Deep Red, entre autres. Les maxima d’absorption et d’émission de fluorescence optimaux du conjugué pHrodo Red BioParticles sont respectivement d’environ 560/585 nm. Cependant, le fluorophore est facilement excité par le laser à ions argon de 488 nm installé sur la plupart des cytomètres en flux.

Le kit de phagocytose pHrodo Red E. coli BioParticles (n° de cat. A10025) pour la cytométrie en flux est conçu pour une mesure rapide et pratique de l’activité phagocytaire dans les échantillons de sang total par cytométrie en flux. Le kit comprend tous les réactifs requis pour évaluer l’ingestion de particules et la lyse des érythrocytes.

Le colorant pHrodo Deep Red est un colorant capteur de pH à faible fond qui ne présente aucun signal dans des conditions neutres et n’est fluorescent que dans des environnements acides. Le colorant pHrodo Deep Red permet une meilleure discrimination du chargement internalisé de l’extérieur de la cellule, car il a un pKa approximatif de 5 et n’est pas fluorescent tant qu’il n’a pas pénétré dans le dernier endosome et lysosome. Le colorant pHrodo Deep Red peut être détecté à l’aide d’un ensemble de filtres fluorescents Cy5 et a été validé pour une utilisation dans diverses applications, notamment la cytométrie en flux, la microscopie par fluorescence, l’analyse à haute densité (HCA) et le criblage à haut débit (HTS). Il peut également être multiplexé avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, verts et rouges tels que GFP et RFP, Mitosox Green ou Red, CellEvent Caspase 3/7 Green ou Red, NucBlue ou TMR, entre autres.

Le conjugué pHrodo Deep Red E. coli BioParticles pour la phagocytose (n° de cat. P35360) est un réactif fluorogénique à faible fond sans lavage développé pour l’étude de la phagocytose dans un système de cellules vivantes. Ce conjugué n’est pas fluorescent à l’extérieur de la cellule, mais est fluorescent en rouge foncé dans les phagosomes. Le faible pKa du conjugué pHrodo Deep Red E. coli BioParticles élimine le signal non spécifique provenant du chargement non internalisé et ne s’allume que dans les derniers endosomes et lysosomes.

Les conjugués de colorant pHrodo Green, comme les conjugués de colorant pHrodo Red et pHrodo Deep Red, donnent des résultats plus rapides et plus précis que tout autre dosage de phagocytose. Les conjugués pHrodo Green ne sont pas fluorescents à l’extérieur de la cellule à un pH neutre, mais sont fortement fluorescents en vert à un pH acide tel que dans les phagosomes. Utilisez le conjugué pHrodo Green S. aureus BioParticles prêt à l’emploi (n° de cat. P35367) et le conjugué pHrodo Green Zymosan BioParticles (n° de cat. P35365) pour la phagocytose dans les applications d’imagerie, HCA, HTS et flux.

Ces produits conjugués pHrodo incluent suffisamment de réactif pour effectuer 100 tests lors de l’utilisation de 100 µl dans chaque puits d’une plaque à 96 puits. Ils peuvent être multiplexés avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, rouges et rouge profond tels que Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP et Mitotracker Deep Red, entre autres.

Le conjugué pHrodo Red Zymosan Bioparticles (n° de cat. P35364) est également disponible, et le colorant pHrodo Green est disponible sous forme de conjugué d’E. coli BioParticles (n° de cat. N° P35366).