Propidiumjodid ist ein häufig verwendeter Totzellfärbemittel, der bei Bindung an DNA rote Fluoreszenz aussendet. Propidiumjodid wird auch als Gegenfärbung in mehrfarbigen Fluoreszenztechniken verwendet. Mit Propidiumjodid ReadyProbes® Reagenz bieten wir eine raumtemperaturstabile Lösung mit klassischem DNA-Färbemittel, die in einer praktischen Tropfflasche geliefert wird. Zum Färben von Zellen einfach zwei Tropfen pro Milliliter auf die Probe geben.

Ebenfalls lieferbar: Propidium-Iodid, Flussspat-Grad bei 12,5-facher Konzentration (13,2 µg/ml, 19,7 µm) in Wasser mit 1 % DMSO.

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Merkmale des ReadyProbes® Propidium-Iodid-Reagenz:
• Gebrauchsfertige Formulierung von flüssigem Propidium-Iodid
• Schnelle Totzellen-Färbung ohne Waschschritte
• Gebrauchsfertige flüssige Formulierung in praktischer Tropfflasche – kein Verdünnen, Abwiegen oder Pipettieren erforderlich
• Stabil bei Raumtemperatur – einsatzbereit an Ihrem Arbeitsplatz oder Zellkulturbereich

Klassischer Totzellen-Farbstoff
Propidium-Iodid ist ein klassischer Fluoreszenzfarbstoff, der häufig zum Einfärben toter Zellen verwendet wird (Abbildung 1). Mit ausreichend großer Stokes-Verschiebung, um den gleichzeitigen Nachweis von nuklearer DNA und FITC oder Alexa Fluor® 488-markierten Antikörpern zu ermöglichen.

Anwenderfreundlichkeit
Propidium-Iodid ReadyProbes® Reagenz wird gebrauchsfertig geliefert und kann direkt neben Ihrem Durchflusszytometer oder in Ihrem Zelllabor aufbewahrt werden. Mit einer flüssigen Zubereitung in einer äußerst praktischen Tropfflasche (Abbildung 2) können Sie Ihre Zellen immer und überall färben. Fügen Sie einfach zwei Tropfen pro ml hinzu, um eine optimal helle und deutliche Kerngegenfärbung zu erreichen.

Mehrere Anwendungen
Propidium-Iodid dringt nicht durch die Membran und wird von lebensfähigen Zellen ausgeschlossen. Es wird daher häufig zur Identifizierung von toten Zellen in einer Population verwendet. Seine spektralen Eigenschaften, die Selektivität für dsDNA und die erhöhte Fluoreszenz, wenn es an DNA gebunden ist, machen Propidium-Iodid ideal für die Verwendung mit grünen Fluorophoren (Alexa Fluor® 488, FITC, GFP) in mehrfarbigen Experimenten. Aufgrund seiner hohen Affinität zu DNA wird es auch häufig zum Zählen von Zellen, Messen von Apoptose und Sortieren von Zellen auf der Grundlage von DNA-Inhalten verwendet.

Anwendungsvorschläge
• In den meisten Fällen reichen 2 Tropfen/1×10⁶ Zellen Propidium Iodid ReadyProbes® Reagenz und eine Inkubationszeit von 15 bis 30 Minuten für eine helle Zellkernfärbung; bei einigen Zelltypen, Bedingungen und Anwendungen kann jedoch eine Optimierung erforderlich sein. In solchen Fällen einfach mehr oder weniger Tropfen hinzufügen, bis die optimale Intensität der Färbung erreicht ist.
• Ist es an Nukleinsäuren gebunden, beträgt das Fluoreszenzanregungsmaximum von Propidium-Iodid 535 nm und das Emissionsmaximum 617 nm. Propidium-Iodid kann mit einer Xenon- oder Quecksilberdampflampe oder mit der 488-Linie eines Argonionenlasers angeregt werden. Im Allgemeinen wird Propidiumiodid-Fluoreszenz im FL2-Kanal von Durchflusszytometern nachgewiesen.
• Als bevorzugter roter Zellkernfarstoff für Totzellanalysen mit Durchflusszytometrie eignet sich das Propidium-Iodid ReadyProbes® Reagenz ideal für die Verwendung mit antikörperbasierten Anwendungen.

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