氧化应激检测活性氧类(ROS)的产生对于需氧生物而言是不可避免的,其在健康细胞中以可控速率发生。 在氧化应激条件下,ROS生成急剧增加,使膜脂质、蛋白质和核酸发生变化。 这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件相关,包括动脉粥样硬化、癌变、缺血再灌注损伤和神经退行性疾病等。

 

 

我们提供多种 Invitrogen™ 荧光检测工具,可追踪氧化应激的不同参数:

这些工具利用荧光显微镜、流式细胞术或微孔板分析等平台。

选择氧化应激检测产品

 

使用 Invitrogen™ CellROX™ Green 试剂检测 U2OS 细胞内的氧化应激。

广义氧化应激

Invitrogen™ CellROX 试剂是一种荧光探针,利用传统的荧光显微镜、高内涵筛选、微孔板荧光光度计或流式细胞术平台,测量细胞内的广义氧化应激。 该染料在还原状态无荧光,氧化后发出明亮的绿色、橙色或深红色荧光。 有些染料可兼容福尔马林固定,能够与其他荧光试剂(包括抗体)同时使用。 检测过程简单可靠,具有灵敏和稳定的荧光读出,并且该试剂适用于生长于完全生长培养基中的细胞。 我们为氧化应激检测提供了 Invitrogen™ CellROX™ 染料和传统探针。

  使用 CellROX Green 试剂检测氧化应激
使用 CellROX Green 试剂检测 U2OS 细胞中的广义氧化应激。

脂质过氧化

脂质过氧化是脂类的氧化降解。ROS是脂质过氧化反应的主要引发物,花生四烯酸和亚油酸等膜结合的多不饱和脂肪酸是其主要靶标。脂质过氧化的副产物会直接损伤细胞膜。它们也会形成蛋白加合物,引起细胞和组织损伤。脂质过氧化反应与很多人类疾病有关,如糖尿病和心血管疾病。 我们提供了适用于活细胞和固定细胞的 Invitrogen™ 工具,具有比率式或单波长读出两种形式。

  使用 Image-iT 脂质过氧化试剂盒检测脂质过氧化
使用 Invitrogen Image-iT 脂质过氧化试剂盒检测脂质过氧化。

选择性ROS检测

超氧化物、过氧化自由基、过氧化氢、羟自由基和过氧亚硝酸盐等 ROS 可以与核酸、蛋白质和脂类发生反应,导致细胞和组织损伤。 某些 ROS 与多种人类疾病有关,如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和衰老。 我们提供的选择性 Invitrogen™ 试剂可检测各种靶向细胞质或线粒体的活性氧类,并利用成像、流式细胞术或微孔板分析进行检测。

  利用 MitoSOX™ Red 超氧化物指示剂检测 ROS
利用 Invitrogen™ MitoSOX Red 超氧化物指示剂检测活细胞中的超氧化物。

基于荧光蛋白的氧化还原传感器

基因编码传感器能够取代有机染料在活细胞内氧化还原电位或氧化应激检测中的应用。roGFP 是一种荧光蛋白嵌合体,在高效的氧化还原作用下,其最大激发波长由 488 nm 变为 400 nm。 通过对 515nm 处的激发光进行比率式检测,可利用该变化检测活细胞中的 H2O2 (Invitrogen™ Premo™ 细胞过氧化氢 H2O2 传感器)或氧化还原电位(Invitrogen™ Premo™细胞氧化还原传感器,Grx-1-roGFP),并且检测具有可逆性和可重现性。 荧光蛋白可与有机染料或其他表达蛋白同时使用,以检测更多的生物学指标。

  Premo™ 细胞氧化还原传感器
利用 Premo 细胞氧化还原传感器检测 U2OS 细胞中的氧化还原电位变化。 

谷胱甘肽

还原型谷胱甘肽也称为 GSH,是与蛋白结合的主要巯基化合物。 此类物质对于检测细胞的氧化还原状态具有重要作用。 因此,GSH水平可用于指示氧化还原电位和细胞阻止氧化应激的能力。 我们提供的Invitrogen™细胞内探针可灵敏检测并定位巯基。

  利用 ThiolTracker™ Violet 染料检测谷胱甘肽。
利用 Invitrogen™ ThiolTracker Violet 染料检测 U2OS 细胞中的 GSH。

氧化应激检测产品选择指南

氧化应激是由活性氧类(ROS)生成能力与细胞的活性氧清除能力失衡所致。 ROS 可与核酸、蛋白质和脂质发生反应并引起细胞和组织损伤,使用选择性或一般性指示剂可对ROS进行检测。

 
读取 CellROX染料在还原状态下无荧光,被活性氧类(ROS)氧化后发出明亮、稳定的荧光。 该染料可渗透细胞膜并易于进入活细胞。 染料本身无荧光,氧化后发出绿色荧光。
常用检测通道 Cy5 RFP FITC FITC
报告基团 CellROX Deep Red 试剂 CellROX Orange 试剂 CellROX Green 试剂 H2-DCFDA
Ex/Em (nm) 640/665 545/565 485/520 495/527
适用于活细胞
可标记完全培养基中的细胞
可甲醛固定
耐洗涤剂
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献    引用文献
成像
HCS
微孔板
流式细胞分析 mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10491(试剂盒)
mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10493(试剂盒)
mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10492(试剂盒)
规格 5 x 50 uL 5 x 50 uL 5 x 50 uL 20 x 50 ug
货 号 C10422 C10443 C10444 C6827

脂质过氧化是脂类的氧化降解。 活性氧类是脂质过氧化反应的主要引发物,花生四烯酸和亚油酸等膜结合的多不饱和脂肪酸是其主要靶标。 脂质过氧化的副产物会直接损伤细胞膜。 它们也会形成蛋白加合物,引起细胞和组织损伤。 脂质过氧化反应与很多人类疾病有关,如糖尿病和心血管疾病。

 
Image-iT 脂质过氧化试剂盒,
适用于活细胞分析
读取 脂质过氧化的比率式指示剂,氧化后由红色荧光变为绿色荧光 单波长指示剂,可检测固定细胞中由脂质过氧化导致的蛋白质变化。
通用滤光片集 FITC 和 Texas Red FITC
荧光基团 BODIPY 581/591 C11 Alexa Fluor 488
Ex/Em (nm)
495/519 581/591 495/519
适用于活细胞
检测固定细胞
全细胞成像
适用于活细胞
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献 引用文献
可甲醛固定 检测固定细胞
支持抗体多冲检测 /
耐洗涤剂
成像
HCS
微孔板
流式细胞分析
规格 500 个反应的试剂盒 500 个反应的试剂盒
货 号 C10445 C10446

超氧化物、过氧化自由基、过氧化氢、羟自由基和过氧亚硝酸盐等 ROS 可以与核酸、蛋白质和脂类发生反应,导致细胞和组织损伤。 某些 ROS 与多种人类疾病有关,如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和衰老。

  二氢乙锭 Premo 细胞过氧化氢 (H2O2) 传感器
特异性 超氧化物 (•O2) 超氧化物 (•O2) 一氧化氮 (NO) 过氧化氢 (H2O2)
读取 靶向线粒体 氧化后由蓝色荧光变为红色荧光 荧光随NO积累而增强 利用400和488nm激发光与515 nm单发射光的比例,检测 H2O2 水平
常用检测通道 Texas Red 德克萨斯红 RFP FITC
荧光基团 MitoSOX Red 二氢乙啶 (DHE) DAF-FM roGFP
Ex/Em (nm)
510/580 518/606 495/515 400 和 488/515
活细胞
可固定
可标记完全培养基中的细胞  
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献 引用文献 引用文献  
成像
HCS
微孔板  
流式细胞分析  
体内    
规格 10 x 50 ug 10 x 1 mg 10 x 50 ug 5 mL
货 号 M36008 D11347 D23844 P36243

还原型谷胱甘肽也称为 GSH,是与蛋白结合的主要巯基化合物。 此类物质对于检测细胞的氧化还原状态具有重要作用。 因此,还原 GSH 水平可用于指示氧化还原电位和细胞阻止氧化应激的能力。

 
读取 GSH 的细胞内探针,适用于亚细胞检测和定位以及亚群监测 与多种低分子量巯基化合物反应,生成荧光偶联物 利用激发光与单发射光的比例,检测氧化还原电位
常用检测通道 DAPI 长通 DAPI
Ex/Em (nm)
404/525 394/490 400 和 488/515
荧光基团 ThiolTracker Violet Monochlorobimane (mBCI) Monobromobimane (mBBr) roGFP
适用于
活细胞
可甲醛固定
支持抗体多色检测
全细胞成像
光稳定性
信噪
参考文献 引用文献 引用文献 引用文献  
成像    
HCS    
微孔板  
流式细胞分析  
规格 180 个反应的试剂盒 500 个反应的试剂盒 25 mg 25 mg 5 mL
货 号 T10095 T10096 M1381MP M1378 P36424

氧化应激是由活性氧类(ROS)生成能力与细胞的活性氧清除能力失衡所致。 ROS 可与核酸、蛋白质和脂质发生反应并引起细胞和组织损伤,使用选择性或一般性指示剂可对ROS进行检测。

 
读取 CellROX染料在还原状态下无荧光,被活性氧类(ROS)氧化后发出明亮、稳定的荧光。 该染料可渗透细胞膜并易于进入活细胞。 染料本身无荧光,氧化后发出绿色荧光。
常用检测通道 Cy5 RFP FITC FITC
报告基团 CellROX Deep Red 试剂 CellROX Orange 试剂 CellROX Green 试剂 H2-DCFDA
Ex/Em (nm) 640/665 545/565 485/520 495/527
适用于活细胞
可标记完全培养基中的细胞
可甲醛固定
耐洗涤剂
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献    引用文献
成像
HCS
微孔板
流式细胞分析 mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10491(试剂盒)
mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10493(试剂盒)
mso-fareast-font-family:"Times New Roman"mso-bidi-font-family:"Times New Roman"
mso-ansi-language:EN-US; mso-fareast-language: EN-US; mso-bidi-language: AR-SA;">C10492(试剂盒)
规格 5 x 50 uL 5 x 50 uL 5 x 50 uL 20 x 50 ug
货 号 C10422 C10443 C10444 C6827

脂质过氧化是脂类的氧化降解。 活性氧类是脂质过氧化反应的主要引发物,花生四烯酸和亚油酸等膜结合的多不饱和脂肪酸是其主要靶标。 脂质过氧化的副产物会直接损伤细胞膜。 它们也会形成蛋白加合物,引起细胞和组织损伤。 脂质过氧化反应与很多人类疾病有关,如糖尿病和心血管疾病。

 
Image-iT 脂质过氧化试剂盒,
适用于活细胞分析
读取 脂质过氧化的比率式指示剂,氧化后由红色荧光变为绿色荧光 单波长指示剂,可检测固定细胞中由脂质过氧化导致的蛋白质变化。
通用滤光片集 FITC 和 Texas Red FITC
荧光基团 BODIPY 581/591 C11 Alexa Fluor 488
Ex/Em (nm)
495/519 581/591 495/519
适用于活细胞
检测固定细胞
全细胞成像
适用于活细胞
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献 引用文献
可甲醛固定 检测固定细胞
支持抗体多冲检测 /
耐洗涤剂
成像
HCS
微孔板
流式细胞分析
规格 500 个反应的试剂盒 500 个反应的试剂盒
货 号 C10445 C10446

超氧化物、过氧化自由基、过氧化氢、羟自由基和过氧亚硝酸盐等 ROS 可以与核酸、蛋白质和脂类发生反应,导致细胞和组织损伤。 某些 ROS 与多种人类疾病有关,如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和衰老。

  二氢乙锭 Premo 细胞过氧化氢 (H2O2) 传感器
特异性 超氧化物 (•O2) 超氧化物 (•O2) 一氧化氮 (NO) 过氧化氢 (H2O2)
读取 靶向线粒体 氧化后由蓝色荧光变为红色荧光 荧光随NO积累而增强 利用400和488nm激发光与515 nm单发射光的比例,检测 H2O2 水平
常用检测通道 Texas Red 德克萨斯红 RFP FITC
荧光基团 MitoSOX Red 二氢乙啶 (DHE) DAF-FM roGFP
Ex/Em (nm)
510/580 518/606 495/515 400 和 488/515
活细胞
可固定
可标记完全培养基中的细胞  
光稳定性
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
参考文献 引用文献 引用文献 引用文献  
成像
HCS
微孔板  
流式细胞分析  
体内    
规格 10 x 50 ug 10 x 1 mg 10 x 50 ug 5 mL
货 号 M36008 D11347 D23844 P36243

还原型谷胱甘肽也称为 GSH,是与蛋白结合的主要巯基化合物。 此类物质对于检测细胞的氧化还原状态具有重要作用。 因此,还原 GSH 水平可用于指示氧化还原电位和细胞阻止氧化应激的能力。

 
读取 GSH 的细胞内探针,适用于亚细胞检测和定位以及亚群监测 与多种低分子量巯基化合物反应,生成荧光偶联物 利用激发光与单发射光的比例,检测氧化还原电位
常用检测通道 DAPI 长通 DAPI
Ex/Em (nm)
404/525 394/490 400 和 488/515
荧光基团 ThiolTracker Violet Monochlorobimane (mBCI) Monobromobimane (mBBr) roGFP
适用于
活细胞
可甲醛固定
支持抗体多色检测
全细胞成像
光稳定性
信噪
参考文献 引用文献 引用文献 引用文献  
成像    
HCS    
微孔板  
流式细胞分析  
规格 180 个反应的试剂盒 500 个反应的试剂盒 25 mg 25 mg 5 mL
货 号 T10095 T10096 M1381MP M1378 P36424