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共有結合（架橋）イムノアッセイプレート
低分子の生体分子を共有結合で固定化するための表面
当社では、ELISAやその他のプレートベースのアッセイで、ペプチド、核酸、ハプテンなどの生体分子を共有結合で固定化するための機能活性化マイクロプレートを各種ご用意しています。。 これらのプレートはアミノ基（NH2）、スルフヒドリル基（SH）、カルボキシル基（COOH）、およびリン酸基（PO4）などの官能基と結合します。
共有結合による固定化は、ポリマー表面と生体分子との間に単一の共有結合を形成することを原理としています。 この技術を用いれば、小さな生体分子だけでなく、適切な官能基を持つ中分子や高分子も固定化できます。 特異的な官能基を介して結合が起こるため、生体分子の配向を制御することもできます。
| 生体分子 | 表面タイプ | 主な特長 |
|---|---|---|
| 遊離NH2基および/またはSH基を持つ生体分子（例：タンパク質、ペプチド、アミノ化オリゴ） | Nunc Immobilizer Amino | 生体分子がパッシブな表面にうまく結合せず、1つ以上の遊離した一次アミノ基またはスルフヒドリル基（ペプチド、オリゴヌクレオチド、タンパク質、プロテオグリカン）を有する場合に適しています。 |
| アミン含有ペプチドおよびその他の分子 | Pierce無水マレイン酸 | 受動吸着では効率的にコーティングできないペプチドやその他のリガンドの固定化に適しています。 無水マレイン酸基と一次アミン（-NH2）との反応により、中性pH以上で安定なアミド結合が形成されます |
| スルフヒドリル基を含む分子 | Pierceマレイミド | 末端システインを含むペプチドなど、ポリスチレンプレートへのコーティングが難しいスルフヒドリル基を有する分子の結合に適しています。 抗体産生中の特異的な抗ハプテン抗体力価を評価するために特に有用なツールです。 |
| -COOH基または-PO4基を持つ生体分子 | Nunc CovaLink | 遊離カルボキシル基またはリン酸基を持つ分子の結合を促進するように設計されています。 そのため、ペプチド、ハプテン、DNAを結合させることができます。 |
| 5'リン酸化または5'アミノ化オリゴヌクレオチドおよび核酸 | Nunc NucleoLink | ヌクレオチドの結合およびハイブリダイゼーションアッセイに最適です |
共有結合プレートタイプ
Nunc Immobilizer Amino表面
Immobilizer™ Amino表面は、求電子性基と生体分子の遊離アミノ基またはスルフヒドリル基との間に安定した共有結合を形成します。 独自のスペーサーアーム構造により、非特異的結合を低く抑え、アッセイ感度を向上させます。 この表面では、追加の結合剤を必要としないため、煩雑で時間のかかるブロッキングステップ省略でき、アッセイ開発を簡素化できます。
Immobilizer Amino表面は次のような特性を備えています：
- 生体分子がパッシブな表面にうまく結合せず、1つ以上の遊離した一次アミノ基またはスルフヒドリル基（ペプチド、オリゴヌクレオチド、タンパク質、プロテオグリカン）を有する場合
- 優れた再現性と低いバックグラウンドの高感度なアッセイを実現します
- コーティング試薬の使用を最小限に抑えます
- プレートの調製に必要なステップ数を削減します
- ブロッキング試薬に関する不要な反応を回避します
Pierce 無水マレイン酸
Pierce無水マレイン酸活性化プレートは、結合アッセイで使用するためにアミン含有ペプチドや他の分子をマイクロプレートウェルに結合させることができます。
無水マレイン酸活性化プレートの特長：
- 第一級アミンと自発的に反応します
- EIAプレートのウェル表面に分子を共有結合させる直接的でシンプルな方法
- 無水マレイン酸は、乾燥した室温条件下で数ヶ月間、結合のための完全性および利用可能性を維持します
これらのプレートは、受動吸着では効率的にコーティングできないペプチドやその他のリガンドを固定化するのに役立ちます。 無水マレイン酸基と第一級アミン（-NH2）との反応により、中性pH以上で安定なアミド結合が形成されます。 酸性条件は結合を加水分解します。たとえば、pH 3.5と37℃での加水分解の半減期は約11時間です。 そのため、コーティング反応はpH 8～9で最適に実行され、ELISAやその他の方法の場合、反応プレートはpH > 7で使用するのが最適です。
Pierceマレイミド
Pierceマレイミド活性化プレートは、末端システインを含むペプチドなどのポリスチレン製プレート上へのコーティングが困難なスルフヒドリル基含有分子の結合に最適です。 当社のコーティングプレートは、抗体産生中の特異的な抗ハプテン抗体力価を評価するために特に有用なツールです。
マレイミド活性化プレートの特長：
- ブロッキング処理済みで非特異的結合を低減します
- 末端システイン誘導体化ペプチドおよび遊離スルフィドリル基を有するタンパク質の容易な（自発的な）固定化
- 結合能： ウェルあたり100～150 pmolのスルフヒドリル基含有ペプチド（307 Da）
- 活性化レベル：100 µL
マレイミドは6.5～7.5のpHで遊離スルフヒドリル基と反応し、安定したチオエーテル結合を形成します。 アミンとの反応は、pH > 7.5で顕著になります。 一部のスルフヒドリル基含有ペプチドおよびタンパク質は、溶液中で酸化してジスルフィド結合を形成する場合があり、マレイミドと反応することはできません。 ジスルフィド結合を還元することで、遊離スルフヒドリル基を生成できます。 TCEPジスルフィド還元ゲルは、還元剤が存在しない状態でサンプルを回収しながら、ペプチドまたはタンパク質の還元を可能にします。 スルフヒドリル基は、N-スクシンイミジルS-アセチルチオ酢酸（SATA）または2-イミノチオラン-HCl（Traut試薬）を用いたアミン修飾により導入できます。
Nunc CovaLink
CovaLink表面は、遊離カルボキシル基またはリン酸基を持つ分子の結合を促進するように設計されています。 そのため、ペプチド、ハプテン、DNAを結合できます。 表面はスペーサーアーム構造により分子へのアクセス性が高まり、表面全体の反応性が向上します。
Nunc NucleoLink
Nunc NucleoLink分割可能モジュールは、耐熱性樹脂を使用しているためハイブリダイゼーションアッセイに最適です。 その独自設計により、誤操作を防ぐ柔軟性が得られ、各ウェルはフレームに固定され、同じ高さを維持することで、正確な測定と効率的な洗浄が可能になります。
- ゲル電気泳動やサザンブロット法のような時間のかかる方法の代わりとしてご使用いただけます
- あらゆるタイプのELISA様検出および測定方法に使用できます
- 標準的なマイクロプレートリーダーに対応しています
- 96ウェルフォーマットのフレームに装着できる1 × 8ストリップで構成されています
- 測定しやすい平底で壁が薄い（0.35 mm）V字型のウェル
- 耐性温度は -20° ～ +120℃
- 使用容量：ストリップ100 μL
関連カテゴリー
タンパク質の架橋、修飾、標識は、タンパク質の構造や相互作用を研究するのに一般的に用いられる技術です。 架橋は、2つ以上の分子を共有結合により化学的に結合するプロセスです。
修飾は、元の分子の溶解性またはその他の特性を変えるための化学基の結合または切断を伴います。 標識は一般的に、架橋や修飾の任意の形態のことを指し、その目的は検出を補助するために化学基（例えば蛍光分子）を結合することです。
FAQ
以下によくある質問をまとめました。より詳しい技術情報やよくある質問は、固相表面ガイドをご覧ください ›
Immobilizer表面結合には、固相への受動的結合と比べていくつかの利点があります。 Immobilizerプレートおよびストリップの利点の1つは、アントラキノンとMicroWellプレートの強い共有結合です。 これは、結合した分子の浸出がないことを意味します。 厳格な洗浄手順とTween 20界面活性剤を使用することで、ウェル内の非特異的結合をさらに回避できます。 また、各ウェル間の変動係数（CV）も非常に低く、均一で再現性のある結果が得られます。
当社は、比色アッセイには透明なポリスチレン製プレートおよびストリップ、バイオおよび化学発光アッセイには白色ポリスチレン製プレート、蛍光アッセイには黒色ポリスチレン製プレートの使用を推奨します。
CovaLink NHモジュールは、8連ストリップの表面修飾光学的に透明なポリスチレン製モジュールです。 タンパク質、ペプチド、オリゴ糖、およびDNAの異なるグループの共有結合を可能にします。 この共有結合特長により、結合した分子を配向させることができるため、分子の活性部位を生化学的活性に利用できます。 CovaLinkの主な特長は、ポリスチレン表面に二次アミノ基がグラフトされており、共有結合の架橋として機能する点です。 光学的に透明な表面により、蛍光または比色信号を読み取ることができます。
リソース
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.