SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit
SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit
Invitrogen™

SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit

Green features
SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットは、最初にRNAを単離することなく、哺乳類細胞ライセートから直接第一鎖cDNAを合成するために最適化されています。細胞の溶解と逆転写は同じチューブで行い、その結果得られた第一鎖cDNAはPCRおよびqPCRですぐに使用できます。 SuperScript詳細を見る
製品番号(カタログ番号)反応数
1175015050反応
11750350500反応
製品番号(カタログ番号) 11750150
価格(JPY)
72,200
Each
お問い合わせください ›
反応数:
50反応
一括またはカスタム形式をリクエストする
SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットは、最初にRNAを単離することなく、哺乳類細胞ライセートから直接第一鎖cDNAを合成するために最適化されています。細胞の溶解と逆転写は同じチューブで行い、その結果得られた第一鎖cDNAはPCRおよびqPCRですぐに使用できます。

SuperScript IVキットの特長は以下のとおりです:
•さまざまな処理条件下で増殖した幅広い哺乳類細胞タイプと互換性があります
•シングルチューブフォーマットは、試薬の損失、サンプルの損失、および処理時間を最小限に抑えます
•ライセートの総量を第一鎖cDNA合成反応に使用できるため、限られた数の細胞でより高い収量が得られ、珍しい転写産物の検出が可能です。
• PCRやqPCRなどのさまざまなアプリケーションで使用するために生成された高品質のcDNA
•37分で完了するシンプルなプロトコル
•さまざまなメーカーのTaqManおよびSYBRGreenqPCRマスターミックスと互換性があります
•サンプルあたり1–10,000細胞の最適化されたパフォーマンス。精製されたRNAから得られる結果と同等の結果です。

SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットには、SuperScript IV逆転写酵素が含まれています。この酵素の特長:
•RNase H活性の低減
•高い熱安定性
•希少転写産物の感度を高め、検出を強化するための、第一鎖合成反応におけるcDNAの高収率
•さまざまなRT阻害剤に対する優れた耐性

SuperScript IV逆転写酵素は、すべてのRT-PCRおよびqRT-PCRアプリケーションに最適です。RT反応における優れた堅牢性と信頼性を備えた、独自のMMLV変異体です。熱安定性の向上、高効率の完全長cDNA合成、RNase活性の低下など、以前の酵素のすべての利点を維持しながら、阻害剤耐性、処理能力、反応速度においてSuperScript III逆転写酵素よりも大幅に改善されています。

仕組み
従来のRT-PCRでは、RNAは最初に、材料の損失につながる可能性がある時間のかかる手順で細胞から分離されます。SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットを使用すると、細胞が溶解され、単一チューブ内のライセートからcDNAが生成されます。これにより、処理が最小限に抑えられ、サンプルロスがなくなります。DNase Iの処理はオプションのステップであり、第一鎖合成の前にゲノムDNAを除去するために使用できます。このキットは、10,000細胞から単一細胞までの小さな細胞サンプル用に最適化されています。

仕様
最終産物タイプcDNA(ファーストストランド)
フォーマットキット
グリーン機能危険性が低く、廃棄物も削減
反応数50反応
最適反応温度50°C
数量50 reactions
反応形態マスターミックス
試薬タイプ逆転写反応試薬
逆転写酵素SuperScript IV
リボヌクレアーゼH活性低減
出荷条件ドライアイス
原料細胞
技術Reverse Transcription
使用対象(アプリケーション)RT-PCR, Real Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR Performance
反応速度高速
Unit SizeEach
組成および保存条件
• SuperScript IV CellsDirect溶解ソリューション、2 x 1.25 mL
• SuperScript IV CellsDirect停止ソリューション、1 x 250 μL
• 溶解エンハンサー、1 x 25 μL
• DNase I、1 x 55 μL
• SuperScript IV RTマスターミックス、1 x 400 μL
• SuperScript IV No RTコントロール、1 x 400 μL

SSIV CellsDirect溶解ソリューションは4℃で保存できます。他のキットコンポーネント(停止ソリューション、DNase I、溶解エンハンサー、SSIV RTマスターミックス、およびSSIV No Rtコントロール)は、–20 ℃に保存する必要があります

よくあるご質問(FAQ)

What are the RT primers included in the SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11750150, 11750350)?

The RT master mix contains both random and oligo dT primers.

What primers come in the SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11750150)? Is it Oligo(dT) primers or random hexamers?

It is both. The RT master mix includes both, random hexamers and Oligo(dT) primers.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

In your SuperScript IV RT protocols, there is no ezDNase inactivation step. Will active ezDNase affect RNA or the RT reaction?

The Invitrogen ezDNase Enzyme is a novel DNase that is highly specific for double-stranded DNA. It has no activity on single-stranded DNA in RT reactions (primers or probes), or on RNA. The enzyme is also thermolabile—it is inactivated quickly at temperatures typical for the SuperScript IV RT reaction (e.g., 50°C). The additional inactivation step is therefore not required in RT-qPCR applications.

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Which SuperScript IV RT format do you recommend for real-time PCR applications?

For RT-qPCR applications we recommend using the Invitrogen SuperScript IV VILO Master Mix (Cat. No. 11756050). The cDNA synthesis reaction setup with this master mix requires fewer pipetting steps and therefore reduces variation in the data. SuperScript IV RT, as a component of the master mix, offers the highest efficiency of cDNA synthesis step compared to competitors’ products.

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Are there any significant changes in the SuperScript IV RT protocol compared to the SuperScript III RT protocol?

The only change is that the incubation time for the reverse transcription reaction has been reduced from 50 minutes to 10 minutes. All the other parameters and steps are the same.

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