SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットは、最初にRNAを単離することなく、哺乳類細胞ライセートから直接第一鎖cDNAを合成するために最適化されています。細胞の溶解と逆転写は同じチューブで行い、その結果得られた第一鎖cDNAはPCRおよびqPCRですぐに使用できます。

SuperScript IVキットの特長は以下のとおりです：
•さまざまな処理条件下で増殖した幅広い哺乳類細胞タイプと互換性があります
•シングルチューブフォーマットは、試薬の損失、サンプルの損失、および処理時間を最小限に抑えます
•ライセートの総量を第一鎖cDNA合成反応に使用できるため、限られた数の細胞でより高い収量が得られ、珍しい転写産物の検出が可能です。
• PCRやqPCRなどのさまざまなアプリケーションで使用するために生成された高品質のcDNA
•37分で完了するシンプルなプロトコル
•さまざまなメーカーのTaqManおよびSYBRGreenqPCRマスターミックスと互換性があります
•サンプルあたり1–10,000細胞の最適化されたパフォーマンス。精製されたRNAから得られる結果と同等の結果です。

SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットには、SuperScript IV逆転写酵素が含まれています。この酵素の特長：
•RNase H活性の低減
•高い熱安定性
•希少転写産物の感度を高め、検出を強化するための、第一鎖合成反応におけるcDNAの高収率
•さまざまなRT阻害剤に対する優れた耐性

SuperScript IV逆転写酵素は、すべてのRT-PCRおよびqRT-PCRアプリケーションに最適です。RT反応における優れた堅牢性と信頼性を備えた、独自のMMLV変異体です。熱安定性の向上、高効率の完全長cDNA合成、RNase活性の低下など、以前の酵素のすべての利点を維持しながら、阻害剤耐性、処理能力、反応速度においてSuperScript III逆転写酵素よりも大幅に改善されています。

仕組み
従来のRT-PCRでは、RNAは最初に、材料の損失につながる可能性がある時間のかかる手順で細胞から分離されます。SuperScript IV CellsDirect cDNA合成キットを使用すると、細胞が溶解され、単一チューブ内のライセートからcDNAが生成されます。これにより、処理が最小限に抑えられ、サンプルロスがなくなります。DNase Iの処理はオプションのステップであり、第一鎖合成の前にゲノムDNAを除去するために使用できます。このキットは、10,000細胞から単一細胞までの小さな細胞サンプル用に最適化されています。