SuperScript VILOマスターミックスは、2ステップRT-qPCRアプリケーション用の第一鎖cDNA合成マスターミックスです。このマスターミックスは、SuperScript III Reverse Transcriptase (RT)とその他のRT反応成分を1本のチューブにまとめたもので、幅広い入力RNA濃度から信頼性の高い第一鎖合成と高いcDNA収率を可能にします。SuperScript III RTの高いRT効率と最適化された処方により、このマスターミックスは、2ステップの定量的RT-PCR(qRT-PCR)アッセイにおいて、幅広い入力RNAテンプレートで高いcDNA合成の直線性を実現します。
注記:RT-qPCRアプリケーションでの優れたcDNA合成性能を得るためには、SuperScript IV VILOマスターミックスまたはSuperScript IV VILOマスターミックス with ezDNase Enzymeをお勧めします。SuperScript IV VILOマスターミックスは、高度な処理が可能で熱安定性の高いSuperScriptにより、信頼できるVILO技術をさらに上のレベルに引き上げます。このマスターミックスは、より高い温度で、より短時間に効率的なcDNA合成を可能にし、最適な純度以下のテンプレートや希少なテンプレートであっても、優れたcDNA収量と感度を提供します。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
最終産物タイプcDNA(ファーストストランド)
フォーマットマスターミックス
反応数50反応
最適反応温度42℃
数量50 reactions
反応形態マスターミックス
試薬タイプ逆転写反応試薬
逆転写酵素SuperScript™ III
リボヌクレアーゼH活性低減
出荷条件ドライアイス
サイズ(最終製品)10 kb以下
原料RNA
技術Reverse Transcription
濃度5X
検出法リアルタイムPCR
使用対象(アプリケーション)Real Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR Performance高
反応速度高速
Unit SizeEach
組成および保存条件
• SuperScript VILO Master Mixには、SuperScript III RT、RNaseOUT Recombinant Ribonuclease Inhibitor、、特許取得済みヘルパータンパク質、ランダムプライマー、dNTPs、MgCl2が含まれています
フリーザー(-5~-30℃)で保管してください。
よくあるご質問(FAQ)
What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?
If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:
- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)
What is the difference between SuperScript III RT and the RT in the SuperScript VILO kit?
The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript
The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11754050) contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript VILO kit is active at 42 degrees C due to the helper proteins.
How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?
While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.
引用および参考文献 (1)
引用および参考文献
Abstract
Hypothalamic distribution of somatostatin mRNA expressing neurones relative to pubertal and adult changes in pulsatile growth hormone secretion in mice.
'The age-associated decline in growth hormone (GH) secretion may be a consequence of the reduction in the number of GH-releasing hormone (GHRH) positive neurones. However, it remains unclear whether an alteration in the number or distribution of somatostatin (SST) neurones contributes to this change. In the present study, we characterised ... More