PureLink™ Pro 96 Viral RNA/DNA Purification Kit

PureLink™ Pro 96ウイルスRNA⁄DNA精製キットは、200-µlの細胞フリー液からウイルスRNAとDNAの両方を抽出できる唯一の96-ウェルシリカプレートシステムです。このシステムは、低深度の96-ウェル遠心分離機バケットを使用するため、感度を損なうことなく簡単に使用できます。キットの特長：
•汎用性 - すべてのサンプルに対応する1つのキットで、プロトコルはウイルスRNAとDNAの抽出の両方に最適化されています
• 2250 x gの96ウェル処理用の遠心分離機の選択可能な最小速度の柔軟性と、深さ5 cmのロータバケットにより、このキットは既存のラボ用遠心分離機用の最も適応性の高いシステムの1つです（図1）。
• ハイスループットへのスピンカラムの移行に適した感度と再現性は信頼性が高く、定量の精度が損なわれることなく、容易です

PureLink™ Pro 96ウイルスRNA⁄DNA精製キットは、従来のシリカプレート抽出化学に基づいています。細胞フリーのサンプルは、精製した核酸の回収率と感度を向上させるために再調製されたバッファーを含むグアニジンで溶解します。一方、キャリアRNAはRNaseの分解からサンプルを保護するために使用します。ウイルスフィルタープレートへのライセートの結合は、深さわずか5cmのバケットを備えた96ウェルロータを使用して、真空マニホールドまたは遠心分離で行うことができます。エタノールベースのバッファーで洗浄した後、100 µlのRNaseフリーの水でウイルスRNAまたはDNAを溶出します。RNAまたはDNAは、ワンステップまたはツーステップのRT-PCRおよびqRT-PCR、qPCR、またはその他の酵素増幅手順ですぐに使用できます。

PureLink™ Pro 96ウイルスRNA⁄DNA精製キットは、ウェル間の優れた一貫性を示します
96ウェル精製システムの重要な要件はウェル間の一貫性です。ウイルス核酸の検出にqRT-PCRと同様の感度の手法を使用する場合は、患者サンプルからのウイルス力価が低いため、サンプル間の一貫性がさらに重要になります。PureLink™ Pro 96ウイルスRNA/DNA精製キットを使用してレンチウイルスRNAのウェル間回収を分析した場合、qRT-PCR分析で一貫したCT値が得られましたが、同じプレートで実行された血漿コントロールは陰性で、相互汚染は見られませんでした（図2）。

96-プレート抽出でスピンカラムと同じ結果が得られます
高スループットと低スループットの両方のフォーマットで当社の新しい精製化学の一貫性を証明するために、Armored RNA™ HCVがヒト血漿にスパイクされ、PureLink™ウイルスRNA⁄DNA Miniキット（スピンカラムベースの精製）またはPureLink™ Pro 96ウイルスRNA/DNA精製キットでウイルス拡散精製に200µLが使用されました。精製されたサンプルは、性能を比較するためにqRT-PCRを使用して分析しました。どちらの精製方法でも、両方の精製プロファイルが拡張可能なqRT-PCR検出プロファイルを示しているため、ウイルスの精製と検出の実証に成功しています（図3）。PureLink™ Pro 96ウイルスRNA⁄DNA精製キットは、スピンカラム精製フォーマットと同等の感度と効率で、高感度で線形の拡張可能なウイルスRNA⁄DNA精製を実現します。

プレートデザインの改善
PureLink™ ProウイルスRNA⁄DNA精製キットには、性能と結果を向上させるために最適化されたセミスカート付きの96ウェルプレート（図4）が付属します。さらに、環状カラーの付いたプレートノズルで、サンプルの相互汚染を防ぎ、シリカ膜の乾燥を向上させてエタノールのキャリーオーバーを防ぎます。また、ベンチトップ型真空マニホールドを使用して、遠心分離（2250×g）により手動でサンプルを処理することも、自動リキッドハンドリングプラットフォームを用いることもできます。セミスカート付きプレート設計は、ロボットワークステーションのほとんどの真空マニホールドに適合します。