PCR Cloning System with Gateway™ Technology with pDONR™221 & OmniMAX™2 Competent Cells
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Citations & References (2)
Invitrogen™

PCR Cloning System with Gateway™ Technology with pDONR™221 & OmniMAX™2 Competent Cells

Gateway™テクノロジーにより、1つ以上の遺伝子をほぼすべてのタンパク質発現システムに迅速にクローニングできます。エントリークローンが作成されたら、目的の遺伝子をGatewayテクノロジーでの使用に適合したさまざまな発現ベクターに組換えることができます。Gateway™テクノロジーを利用したPCR Cloning Systemは、attB修飾カスタムプライマーでのPCRの後にエントリークローンを作成するように設計されています（図1）詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
1253502920反応
製品番号（カタログ番号） 12535029
価格（JPY）
137,400
Each
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数量:
20反応
Gateway™テクノロジーにより、1つ以上の遺伝子をほぼすべてのタンパク質発現システムに迅速にクローニングできます。エントリークローンが作成されたら、目的の遺伝子をGatewayテクノロジーでの使用に適合したさまざまな発現ベクターに組換えることができます。Gateway™テクノロジーを利用したPCR Cloning Systemは、attB修飾カスタムプライマーでのPCRの後にエントリークローンを作成するように設計されています（図1）。PCR産物は、通常は>99 %の効率で、一方向にクローニングされています。Gateway™テクノロジーを利用したPCR Cloning Systemには、以下のものが含まれます。

•PCR産物の迅速かつ効率的な特定部位クローニング
• あらゆる増幅酵素を使用できる汎用性
• 制限付きエンドヌクレアーゼやリガーゼを必要としないクローニング
• カナマイシンまたはゼオシンによるエントリークローンの選択™

さらに、pDONR™221ベクターおよびpDONR™/Zeoベクターは、プラスミドの高収量のためのpUC起源と、使いやすさのためのユニバーサルM13シーケンシング部位を有しています。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
クローニング法Gateway™
反応数20 reactions
製品ラインOne Shot
製品タイプPCRクローニングシステム
数量20反応
ベクターpDONR
Unit SizeEach
組成および保存条件
Gateway™テクノロジーを利用したPCRクローニングキットには、Gateway™ BPクロナーゼII酵素ミックスおよび試薬、Gateway™ pDONR™221またはpDONR™/Zeoベクター、M13シーケンシングプライマー、PEG/Mg2+溶液、プロテイナーゼK、pEXP7-tetポジティブコントロール、およびOne Shot™ OmniMAX™2コンピテントセルが含まれます。コンピテントセルおよび酵素ミックスを-80℃で保管してください。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。

よくあるご質問（FAQ）

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.

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引用および参考文献 (2)

引用および参考文献
Abstract
Participation of an Endomembrane Cation/H+ Exchanger AtCHX20 in Osmoregulation of Guard Cells.
Authors:Padmanaban S, Chanroj S, Kwak JM, Li X, Ward JM, Sze H,
Journal:Plant Physiol
PubMed ID:17337534
'Guard cell movement is induced by environmental and hormonal signals that cause changes in turgor through changes in uptake or release of solutes and water. Several transporters mediating these fluxes at the plasma membrane have been characterized, however less is known about transport at endomembranes. CHX20, a member of a ... More
Cytosolic Hydroxymethyldihydropterin Pyrophosphokinase/Dihydropteroate Synthase from Arabidopsis thaliana: A SPECIFIC ROLE IN EARLY DEVELOPMENT AND STRESS RESPONSE.
Authors:Storozhenko S, Navarrete O, Ravanel S, De Brouwer V, Chaerle P, Zhang GF, Bastien O, Lambert W, Rébeillé F, Van Der Straeten D,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:17289662
In plants, 6-hydroxymethyl-7,8-dihydropterin pyrophosphokinase/7,8-dihydropteroate synthase (mitHPPK/DHPS) is a bifunctional mitochondrial enzyme, which catalyzes the first two consecutive steps of tetrahydrofolate biosynthesis. Mining the Arabidopsis genome data base has revealed a second gene encoding a protein that lacks a potential transit peptide, suggesting a cytosolic localization of the isoenzyme (cytHPPK/DHPS). When ... More