Pierce™ Firefly Luciferase Flash Assay Kit
Pierce™ Firefly Luciferase Flash Assay Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Firefly Luciferase Flash Assay Kit

Thermo Scientific Pierce Firefly Luciferase Flash Assay Kitには、非常に強く発光して急速に減衰するシグナルを産生する、全細胞内の赤色発光ホタルルシフェラーゼ活性を測定するための試薬が含まれます詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
16174100反応キット
161751000反応キット
製品番号（カタログ番号） 16174
価格（JPY）
20,700
Each
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数量:
100反応キット
Thermo Scientific Pierce Firefly Luciferase Flash Assay Kitには、非常に強く発光して急速に減衰するシグナルを産生する、全細胞内の赤色発光ホタルルシフェラーゼ活性を測定するための試薬が含まれます。

Firefly Luciferase Flash Assay Kitの特長：

•ホタルルシフェラーゼ活性を高感度に検出
• Pierce Firefly Luciferase Signal Enhancerとの併用で最良の結果（最大シグナル）を実現
• 反応液は-20℃で最長2ヶ月間安定
• アッセイ試薬は他のホタルルシフェラーゼとも適合
• 自動化に適合
• 汎用の細胞溶解バッファーと最適化済みフラッシュアッセイ試薬を同梱
• 安全な非放射性アッセイ

hermo Scientific Pierce Firefly Luciferase Flash Assay Kitには、哺乳類の全細胞ライセート中のホタルルシフェラーゼ活性を測定するための試薬が含まれます。このキットには細胞溶解バッファー、アッセイバッファー、およびホタル基質が含まれるため、プロモーターまたは経路活性の細胞内検出のための完全な試薬システムを提供します。ルシフェラーゼ反応によって生じる発光シグナルはルミノメーターで捕捉できます。シグナルは、産生されたホタルルシフェラーゼタンパク質量と相関し、ホタル遺伝子発現を誘導するプロモーターの活性測定に用いることができます。これらの試薬は、Thermo Scientific Firefly Luc Plasmidsと併用するように最適化されていますが、このFlash Assay Kitは、D-ルシフェリンを基質として使用する他のホタルルシフェラーゼまたはATP依存性ルシフェラーゼ活性検出にも使用できます。

内容：
細胞溶解バッファー、反応バッファー、および基質；Luciferase Signal Enhancerは別途購入。

必要なもの：
• ホタルルシフェラーゼ、およびルミノメーター、または発光モニタリングが可能な他の機器（Thermo Scientific Luminoskan AscentやVarioskan Flashマイクロプレートリーダーなど）。
•最良の結果（最大シグナル）を得るにはPierce Firefly Luciferase Signal Enhancerと併用。

アプリケーション：
• cis調節因子およびtrans作用因子を解析するためのプロモーター研究
• 薬物スクリーニング
• siRNAおよびmiRNAのスクリーニング
• オフターゲット効果を研究するマルチプレックスアッセイ
• 分泌経路およびタンパク質局在レポーターアッセイ
• シグナル伝達経路解析
• RNAスプライシング研究

ホタルルシフェラーゼは、ホタル科の甲虫（Photinus属やLuciola属など）の数種が天然に産生する60 kDaのタンパク質です。ホタルルシフェラーゼの生物発光シグナルは、D-ルシフェリンの酸化によるものです。ルミノメーターで捕捉した発光シグナルは、産生されたホタルルシフェラーゼタンパク質量と相関し、ホタル遺伝子発現を誘導するプロモーター活性測定に用いることができます。

その他の製品データ
• マルチプレックスルシフェラーゼレポーターを用いたニューロン分化のモニタリング
• 農薬化学物質による抗酸化応答経路の活性化
• 多用途性ルシフェラーゼ：マイクロプレート発光計およびフラッシュルシフェラーゼアッセイ
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
アッセイレポーター酵素、ルシフェラーゼレポーターアッセイ
適合する細胞哺乳類細胞
検出法バイオ発光
使用対象 (装置)ルミノメーター（マイクロプレート）
フォーマット384ウェルプレート、96ウェルプレート
標識タイプ酵素標識
製品ラインPierce
数量100反応キット
基質D-ルシフェリン
基質特性化学基質
基質タイプルシフェラーゼ基質
ターゲットルシフェラーゼ、ホタルルシフェラーゼ
技術高度化学発光性
タイプアッセイキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
• ホタルフラッシュアッセイバッファー、5 mL、4℃保存
• D-ルシフェリン、凍結乾燥、3 mg、4℃保存
• 2X Cell Lysis Buffer、6 mL、室温保存

キットを受け取り後4℃で保存、または各コンポーネントを個別に指定温度で保存。

よくあるご質問（FAQ）

I got a high background signal with a Firefly Luciferase Glow/Flash assay. Why is this?

This could be due to contamination of the control sample. Make sure to use new sample and change pipette tips after each well.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

I got a high signal with a Firefly Luciferase Glow/Flash assay. What could have happened?

This could be due to high luciferase expression. Here are some suggestions:

  • Reduce incubation time before collecting samples. 
  • Decrease the integration time on the instrument.
  • Dilute the sample 
    Note: A low sample volume can increase assay variability. Dilute the sample and use the recommended volume of 10-20 µL per assay



    • Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

    What could be causing no signal or low signal with the Firefly Luciferase Glow/Luciferase Flash assay? Do you have any suggestions to get around this problem?

    Here are possible causes and solutions:

    - Low transfection efficiency: Optimize transfection conditions using a visual transfection control (e.g., a plasmid over-expressing a fluorescent protein); Verify plasmid DNA quality - use only transfection grade DNA; Use actively dividing, low passage cells; Use a different cell type.
    - No or low promoter activity: Use conditions known for promoter activation; Incubate cells for a longer time; Change growth conditions to improve expression; Use a different promoter.
    - D-luciferin auto-oxidized: Protect substrate from light and maintain 100X D-luciferin at -20 degrees C; Prepare new Working Solution if used longer than 4 hours.
    - Low luciferase expression: Use Pierce Firefly Signal Enhancer (100X) (Cat. No. 16180); Lyse cells in a smaller volume of 1X Cell Lysis Buffer; Use a different promoter or growth conditions to improve expression; Increase the integration time on the instrument; Scale-up the volume of sample and reagent per well.
    - Degraded luciferase protein: Store cell lysates on ice and perform assays immediately following cell lysis.

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    I got a high background signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What went wrong?

    Here are possible causes and solutions:

    - Non-specific oxidation of substrate: Use less serum in the cell culture media; Note: Albumin can increase the auto-oxidation of Vargulin; Avoid repeated freezing and thawing of the sample.
    - Control sample is contaminated: Use new sample; Change pipette tips after each well.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

    I am getting a high saturating signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What could have happened?

    This could be due to high luciferase expression. Here are some suggestions:

  • Reduce incubation time before collecting samples. 
  • Decrease the integration time on the instrument.
  • Dilute the sample: for secreted Gaussia/Cypridina Luciferase, dilute the sample using media from the cell culture; for cell lysate, dilute the sample using lysis buffer 


    • Note: A low sample volume can increase assay variability. Dilute the sample and use the recommended volume of 10-20 µL per assay.

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