Thermo Scientific Pierce Cypridina-Firefly Luciferase Dual Assay Kitは、哺乳類の全細胞ライセート中の細胞内のウミホタルおよび赤色発光ホタルルシフェラーゼ活性を同時検出するために必要な試薬を提供します。

Cypridina-Firefly Luciferase Dual Assay Kitの特長：

•同時検出—フィルターを使用して波長を分離することで、2つのルシフェラーゼ活性を同時検出
• 高感度—鮮やかな青色のウミホタルと、赤色発光ホタルのルシフェラーゼ活性を同一サンプル内で測定可能
• 迅速—従来の連続デュアルアッセイとは異なり、消光ステップは不要
• マルチプレックス—同一サンプル内で2つの細胞活性を定量可能

Pierce Cypridina-Firefly Luciferase Dual Assay Kitは、ウミホタルと赤色発光ホタルのルシフェラーゼ活性の同時検出を可能にする高感度アッセイです。ウミホタルルシフェラーゼは実験レポーターとして機能し、構造的に活性化された赤色発光ホタルは標準化コントロールとして機能します。以下の動画が示すように、レポーターとコントロールを組み合わせることで、基質試薬の添加または消光を2段階で行うことなく、実験レポーターとコントロールのルシフェラーゼ活性を1回の読み取りアッセイで同時にモニタリングできます。アッセイの反応液は両方のルシフェラーゼに対応した基質を含み、フラッシュタイプのカイネティクスによって反応は同時に起こります。その結果としての発光シグナルは、フィルターを使用してスペクトル分解できます。1つのサンプルから、調節因子の転写活性、シグナル伝達経路、および活性化因子または阻害因子の効果をアッセイできます。

内容：
細細胞溶解バッファー、反応バッファー、Vargulin基質およびD-ルシフェリン基質

必要なもの：
ウミホタルおよび赤色発光ホタルルシフェラーゼレポーター、ウミホタルルシフェラーゼ用のフィルター（425～525 nm）と、赤色ホタルルシフェラーゼ用のフィルター（615～675 nm）のセット；ルミノメーター、または発光モニタリングが可能な他の機器（Thermo Scientific Luminoskan AscentやVarioskan Flashマイクロプレートリーダーなど）；25ウェル以上を同時測定する場合はインジェクターが必要。

アプリケーション：
• 2つの調節因子の同時解析
• 2つのシグナル伝達経路の同時モニター
• 1回のスクリーニングで複数ターゲットを解析（オフターゲット効果など）

アプリケーションビデオ：
ウミホタルルシフェラーゼは、ホタルや天然のウミシイタケルシフェラーゼより明るい生物発光シグナルを放出します。ウミホタルルシフェラーゼが生成する生物発光シグナル（λmax = 463 nm）は、Vargulinの酸化によって生じます。この反応には、アデノシン三リン酸（ATP）や他の補因子は必要ありません。赤色発光ホタルルシフェラーゼは、Luciola cruciata由来の日本ゲンジボタルルシフェラーゼの変異型です。このルシフェラーゼは、ATPの存在下でD-ルシフェリンの酸化から生じる、赤色帯域にシフトした発光スペクトル（λmax = 613 nm）を生成します。赤色発光ホタルおよびウミホタルルシフェラーゼは、シグナルのスペクトル分解が可能なため、デュアルアッセイで使用できます。

その他の製品データ
• 高感度マルチプレックスルシフェラーゼレポーターアッセイ
• ルシフェラーゼレポーターアッセイの同時デュアル発光検出
• 多重ルシフェラーゼレポーターを用いた神経分化のモニタリング
• 農薬化学物質による抗酸化反応経路の活性化