Pierce™ Firefly Luc One-Step Glow Assay Kit

Thermo Scientific Pierce Firefly One-Step Luc Glow Assay Kitは、1回の試薬添加ステップで哺乳類細胞培養中のホタルルシフェラーゼ活性を測定できるため、ハイスループットスクリーニング（HTS）アプリケーションに最適です。

Firefly One-Step Luc Glow Assay Kitの特長：

•高感度—ホタルルシフェラーゼ活性の高感度検出
• 無臭—試薬は悪臭や有毒臭がないため、ドラフト内で作業する必要なし
• 便利—ワンステップの混合＆測定プロトコル；追加の試薬は不要
• 安定—フラッシュアッセイよりも長いシグナル半減期と向上した安定性
• シンプル—インジェクター搭載のルミノメーターは不要
• 自動化に対応—ハイスループットアッセイに適合

このグロータイプルシフェラーゼアッセイキットは、適切なホタルルシフェラーゼレポーター酵素を発現しているベクターでトランスフェクションしたた哺乳類培養細胞で使用するように設計されています。このキットは、インジェクターを搭載していないルミノメーターやハイスループットスクリーニング（HTS）アプリケーションに特に適した特長を備えています。便利なワンステップの均一なプロトコルは処理ステップを最小限に抑え、自動化の使用をサポートします。同梱の基質溶液とアッセイバッファーを混合して1つの反応溶液を作成し、トランスフェクションされた処理済み細胞を含むマイクロプレートウェルに添加するだけです。このシステムの安定したシグナル出力（グロー）は、インキュベーション時間に関して柔軟性を提供します。このキットをThermo Scientific Firefly Luc Plasmidsと併用すると、プロモーターまたは経路活性を検出するための高感度生物発光レポーターアッセイシステムが実現します。

内容：
アッセイバッファーおよび基質溶液（100X）

必要なもの：
ホタルルシフェラーゼと、ルミノメーター、またはThermo Scientific Luminoskan AscentやVarioskan Flashマイクロプレートリーダーなどの発光をモニタリング可能な装置。

アプリケーション：
• cis-およびtrans-作用性調節エレメントを解析するためのプロモーター研究
• 薬物スクリーニング
• siRNAおよびmiRNAのスクリーニング
• オフターゲット効果を研究するためのマルチプレックスアッセイ
• タンパク質局在レポーターアッセイ
• シグナル伝達経路解析

ホタルルシフェラーゼは、ホタルの甲虫(Photinus属やLuciola属など)の数種が天然に産生する60 kDaのタンパク質です。Thermo Scientific Red Firefly Luciferaseの発光範囲は560～700 nm（λmax = 613nm）です。ホタルルシフェラーゼの生物発光シグナルは、D-ルシフェリンの酸化反応によるものです。ルミノメーターを使用して捕捉した発光シグナルは、産生されたホタルルシフェラーゼタンパク質量と相関し、ホタル遺伝子発現を誘導するプロモーター活性の測定に用いることができます。ホタルルシフェラーゼの生物発光は、調節因子の転写活性を測定するための非放射性アッセイを可能にします。ホタルルシフェラーゼレポーター活性は、プロモーター活性の測定、細胞内の上流経路活性の研究、または活性化物質や阻害物質の効果の測定に使用できます。